[發明專利]灰斑蛤蚧和紅斑蛤蚧的微衛星標記技術

無效

• 申請號: 200810073839.2
• 申請日: 2008-10-17
• 公開（公告）號: CN101372711A
• 公開（公告）日: 2009-02-25
• 發明（設計）人: 李力;繆劍華;徐永莉
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區藥用植物園
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種灰斑蛤蚧和紅斑蛤蚧的微衛星標記技術，其特征在于：其技術步驟包括蛤蚧微衛星序列的獲得、微衛星引物設計、PCR擴增和擴增產物進行檢測。

2.根據權利要求1所述的灰斑蛤蚧和紅斑蛤蚧的微衛星標記技術，其特征在于：蛤蚧微衛星序列的獲得包括構建基因組文庫(300一800bp)，根據欲得到的蛤蚧SSR類型設計合成寡核苷酸探針，通過菌落原位雜交篩選所需的重組克隆對陽性克隆進行順序鑒定。

3.根據權利要求1所述的灰斑蛤蚧和紅斑蛤蚧的微衛星標記技術，其特征在于：對具高度專一性微衛星兩側序列進行蛤蚧微衛星引物設計，擴增同一種蛤蚧甚至不同種蛤蚧的其它基因型片段，微衛星引物在基因組中每一條引物長18-24bp。

4.根據權利要求1所述的灰斑蛤蚧和紅斑蛤蚧的微衛星標記技術，其特征在于：PCR擴增用的蛤蚧模板包括從蛤蚧全身所有皮膚、組織、器官、血液之一為對象而抽提而來的核基因組DNA或mtDNA中的同源片斷，以其為模板，用合成引物進行PCR擴增，擴增時需摻入同位素或其它在效果上可替代放射性物質的標記，對擴增產物進行分析。

5.根據權利要求1所述的灰斑蛤蚧和紅斑蛤蚧的微衛星標記技術，其特征在于：對擴增產物進行檢測包括擴增產物經變性(非變性)聚丙烯酰胺凝膠(0.5—12％濃度)電泳，凝膠干燥后通過放射性自顯影顯示結果，根據膠片上的條帶分布，分析樣本多樣性，同時包括用銀染來檢測擴增產物。