[發明專利]薄皮核桃的組培快繁方法

無效

• 申請號: 200810072903.5
• 申請日: 2008-06-18
• 公開（公告）號: CN101297637A
• 公開（公告）日: 2008-11-05
• 發明（設計）人: 王曉軍;胡石開;郝秀英;劉敏;徐琴;劉傳軍
• 申請（專利權）人: 中國科學院新疆理化技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 烏魯木齊中科新興專利事務所
• 代理人: 張莉

技術領域

本發明涉及一種植物組織培養和快速繁殖領域，具體地說涉及新疆薄皮核桃的組織培養和快速繁殖方法。?

背景技術

核桃(Juglans?regia?L.)古稱胡桃或羌桃，屬核桃科(Juglandaceae)，核桃屬，原產于歐洲東南部及亞洲西部，我國也是核桃原產地之一。由于核桃是果材兼用的優良經濟樹種，又作為世界四大干果(核桃、扁桃、腰果、榛子)之一，所以它以其很高的經濟、生態及社會效益在世界各地廣泛栽培。我國栽培核桃已有2000多年以上歷史，相傳兩千多年前西漢的張騫出使西域，從波斯(今伊朗)將核桃引進我國，從此核桃成為我國北方各地的重要干果之一。?

核桃是新疆主要的經濟林樹種之一，也是新疆林果業中最具市場競爭力的特色產品，也是近年來南疆林果業中規模面積擴張最快的樹種。就新疆而言，每年種植核桃的面積都會在1.3萬公頃以上。所以，每年將需要大量的優良核桃苗木，培育優良核桃苗木就有巨大的商業價值和市場前景。?

新疆核桃栽培歷史悠久，其源于天山西部和昆侖山的野核桃，距今已有1300多年的栽培歷史。由于世代實生繁殖，在其實生群體中，混生著早、晚實兩種性狀的核桃類群，經長期自然相互雜交，一方面形成了高度混雜群體，使得種質資源變得異常豐富多彩(王國安，新疆早實核桃豐產技術講座(一)農村科技2006(1)39)；另一方面使得植株間、品種間良莠不齊，形成了很多復雜的群體。例如，核桃的出仁率在30-80％之間，品種的區域差異性很大。品種的差別對核桃生產的發展和產量的提高影響很大。因此，選擇優質、豐產、抗逆?性強以及早實的優良品種是核桃豐產的重要途徑。但是常規選種方法選出的優良單株，其后代仍用種子繁殖，核桃在自由授粉的實生后代中，在堅果大小、重量等方面會出現較大變異，不能使優良品種長久保持其優良性狀。為了防止實生苗的變異退化，就必須采用營養繁殖，即嫁接、扦插和組培等繁殖方法。但是目前除嫁接外，幾乎不能用其他方法進行營養繁殖，扦插不易生根，嫁接又因接口處易發生氧化褐變而難以成活，嫁接成活率很低，而且還要先培育砧木，較費工費力。因此，組培快速繁殖技術是解決核桃無性繁殖的很好辦法。?

發明內容

本發明涉及新疆薄皮核桃的組織培養和快速繁殖方法，該方法由獲得無菌苗、芽的增殖、誘導芽生根和練苗與移栽四個步驟完成，提供了大田外植體的消毒處理方法、最佳的芽增殖培養基和誘導芽生根培養基?？梢栽诙虝r間里獲得大量新疆薄皮核桃種苗，適用于新疆薄皮核桃的產業化育種，也為新疆薄皮核桃的優良品種選擇和轉基因研究奠定了基礎。?

發明所述的薄皮核桃的組織培養和快速繁殖方法，由獲得無菌苗、芽的增殖、芽的生根和練苗與移栽步驟完成，具體操作按下列步驟進行：?

a、剪取大田核桃枝條，用自來水流動沖洗10-180min，然后將枝條剪切成1-2cm莖段，然后將莖段在超凈工作臺上用75％酒精表面消毒10-180s，0.1％升汞滅菌1-30min，15％雙氧水處理10-120min，無菌水沖洗4-6次；?

b、將步驟a中處理后的莖段接入誘導培養基DKW+TDZ?0.1-2.0mg/L+IBA?0.01-0.5mg/L中，溫度23±1℃，光照2500-3000?lx，時間16h/d，20-35d進行誘導培養；?

c、將步驟b中誘導培養出的新長腋芽苗切成帶一個腋芽的莖段，接入培養基DKW+6-BA?0.1-2.0mg/L+IBA?0.001-0.5mg/L中，置于溫度23±1℃，光照3000-4000?lx，時間16h/d進行培養；?

d、將步驟c中1.0-2.0cm的幼苗切下，接入培養基(1/8-1)DKW+IBA?1-20mg/L中，置于溫度23±1℃，黑暗處理1-20天誘導根源基生成；?

或將步驟c中1.0-2.0cm的幼苗切下，將其根部放入經常規滅菌后的IBA溶液中處理10-180min，再接入培養基(1/8-1)DKW中并于置于溫度23±1℃，黑暗處理1-20天條件下誘導根源基生成；?

e、將步驟d中的經黑暗處理的幼苗，接入培養基(1/8-1)DKW中并于置于溫度23±1℃，光照3000-4000lx，時間24h/d進行培養，誘導根的生成；?

或將步驟d中的幼苗取消黑暗處理，置于溫度23±1℃，光照3000-4000lx，時間24h/d進行培養，誘導根的生成；?