[發明專利]假高粱及其近似種PCR鑒定方法及其試劑盒無效
| 申請號: | 200810072360.7 | 申請日: | 2008-12-12 |
| 公開(公告)號: | CN101748191A | 公開(公告)日: | 2010-06-23 |
| 發明(設計)人: | 郭瓊霞;黃嫻;黃振;虞赟;黃可輝;沈建國;王念武 | 申請(專利權)人: | 福建出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 350003 福建省*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 高粱 及其 近似 pcr 鑒定 方法 試劑盒 | ||
1.一種快速鑒定假高梁、黑高粱、絲克高粱、擬高粱、蘇丹草的方法,包括提取種子DNA,普通PCR鑒別,PCR循環,非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,分別與標準圖譜對比,其特征在于:所述的普通PCR鑒別步驟采用的引物為,
引物JH-1:5’-GGAAGGTCACAACCTGCATC-3’
引物JH-2:5’-CCATCTGTTCCTTCCCATCT-3’
引物SK-1:5’-AAAAGCAAGCAACGGGAAC-3’
引物SK-2:5’-TTTTGGCCTTCCTCTTGGTA-3’
引物HS-1:5’-GCAGCTCAGGGACAAATAC-3’
引物HS-2:5’-CTGCTTCAGGTAAGGATCG-3’。
2.如權利要求1所述的快速鑒定假高梁、黑高粱、絲克高粱、擬高粱、蘇丹草的方法,其特征在于:所述的標準圖譜比對包括如下步驟,
利用引物JH進行PCR反應,與JH標準圖譜對比,若在250bp和280bp處產生條帶,則受試樣品為假高粱或黑高粱;
利用引物SK進行PCR反應,與SK標準圖譜對比,若在110bp處產生條帶,則受試樣品為絲克高粱;
利用引物HS進行PCR反應,與HS標準圖譜對比,若在250bp處有條帶,則受試物種為黑高粱;若在110bp和130bp處均有條帶,則受試物種為蘇丹草;
利用引物JH進行PCR反應,與JH及HS標準圖譜對比,在250bp、280bp兩處均有特異條帶,而此樣品利用HS引物進行PCR反應未在250bp處產生特異條帶,則受試樣品為假高粱;
分別利用JH、SK及HS進行PCR反應,并與JH、SK及HS標準圖譜對比,若都沒有出現特異性的條帶,則該受試物種為擬高粱。
3.一種權利要求書1或2所述的快速鑒定假高梁、黑高粱、絲克高粱、擬高粱、蘇丹草的方法所使用的PCR分子鑒定試劑盒,其特征在于:該試劑盒至少含有用于權利要求1或2中所述的PCR反應的引物及標準圖譜。
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