[發(fā)明專利]利用分子標(biāo)記技術(shù)區(qū)分鳳尾菇與糙皮側(cè)耳的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810072137.2
• 申請(qǐng)日: 2008-11-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101392288A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉新銳;吳小平;謝寶貴;鄧優(yōu)錦;朱堅(jiān)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1、一種利用分子標(biāo)記技術(shù)區(qū)分鳳尾菇與糙皮側(cè)耳的方法，包括菌絲的培養(yǎng)與收集、基因組DNA的提取、ITS-PCR擴(kuò)增、特異酶切片段標(biāo)記的產(chǎn)生和酶切產(chǎn)物的電泳檢測(cè)；其特征在于

(1)特異酶切片段標(biāo)記的產(chǎn)生：在4～8μl?PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，加入1μlHaeIII酶的酶切Buffer，0.3～1μl?HaeIII酶，2.2～2.8μl?ddH₂O，37℃水浴4～10h；

(2)酶切產(chǎn)物的電泳檢測(cè)：取HaeIII酶的酶切產(chǎn)物10μL，與2μL上樣緩沖液混勻，點(diǎn)樣于1.2％的瓊脂糖凝膠上，于0.5X?TBE緩沖液中，5V/cm電壓下電泳；經(jīng)電泳檢測(cè)，分子量為425～435bp和175～185bp的DNA標(biāo)記條帶，是鳳尾菇菌株的標(biāo)志；分子量為235～245bp和175～200bp的DNA標(biāo)記條帶，是糙皮側(cè)耳菌株的標(biāo)志。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用分子標(biāo)記技術(shù)區(qū)分鳳尾菇與糙皮側(cè)耳的方法，其特征在于

(1)特異酶切片段標(biāo)記的產(chǎn)生：6μl擴(kuò)增產(chǎn)物，1μlHaeIII酶的酶切Buffer，0.7μl?HaeIII酶，2.6μl?ddH₂O，37℃水浴4h；

(2)酶切產(chǎn)物的電泳檢測(cè)：經(jīng)電泳檢測(cè)，分子量為430bp和182bp的DNA標(biāo)記條帶，是鳳尾菇菌株的標(biāo)志；分子量為243bp和190bp的2個(gè)條帶，是糙皮側(cè)耳菌株的標(biāo)志。