[發明專利]重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白及制備方法無效
| 申請號: | 200810069786.7 | 申請日: | 2008-05-30 |
| 公開(公告)號: | CN101284877A | 公開(公告)日: | 2008-10-15 |
| 發明(設計)人: | 胡宗利;張寧;陳國平;李勇;顧峰;候曉姝 | 申請(專利權)人: | 重慶大學 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N15/81;A61K38/16;A61P7/02 |
| 代理公司: | 重慶志合專利事務所 | 代理人: | 胡榮琿 |
| 地址: | 400044重慶*** | 國省代碼: | 重慶;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 重組 靶向 抗凝 活性 血小板 聚集 融合 蛋白 制備 方法 | ||
1.一種重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白,其特征在于:由靶向的FXa識別序列和抗凝血酶活性和抗血小板聚集的RGD-HV組成,所述融合蛋白氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所述。
2.根據權利要求1所述的抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白,其特征在于:RGD-HV的氨基酸具有SEQ?ID?NO:1序列,RGD序列位于水蛭素32-35突變位點;FXa識別序列為人FXa凝血因子的識別序列。
3.根據權利要求1所述的重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白,其特征在于:FXa識別序列位于融合蛋白的N-末端,RGD-HV位于融合蛋白的C-末端。
4.根據權利要求1所述的重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白,其特征在于:所述重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的N端融合有一個9×His-tag。
5.根據權利要求4所述的重組靶向雙功能水蛭素的融合蛋白,其特征在于:所述重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白與9×His-tag之間有一個腸激酶酶切位點。
6.編碼權利要求1-5中重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的DNA序列,具有SEQ?ID?NO:3的DNA序列。
7.包含權利要求5所述的DNA序列的重組表達載體pPIC9K/FXa-RGD-HV。
8.制備重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的方法,包括用權利要求6重組表達載體轉化畢赤酵母細胞,分離、純化所述重組靶向雙功能水蛭素的融合蛋白。
9.根據權利要求7所述的制備重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的方法,其特征在于:表達系統的宿主為畢赤酵母GS115。
10.權利要求1所述的重組靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的的融合蛋白用于制備靜脈和動脈血栓性疾病的藥物的用途。
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