[發(fā)明專利]一種紅皮云杉體細(xì)胞胚誘導(dǎo)植株再生的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810064037.5
• 申請(qǐng)日: 2008-02-27
• 公開（公告）號(hào): CN101228848A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李成浩;劉寶光;張含國(guó);劉桂豐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所
• 代理人: 金永煥

1.一種紅皮云杉體細(xì)胞胚誘導(dǎo)植株再生的方法，其特征在于紅皮云杉體細(xì)胞胚誘導(dǎo)植株再生的方法按以下步驟實(shí)現(xiàn)：一、取經(jīng)過(guò)預(yù)處理的紅皮云杉合子胚接種于額外添加6-芐基氨基嘌呤、激動(dòng)素、萘乙酸、谷氨酰胺、水解酪蛋白、蔗糖和膠立得的改良RJW培養(yǎng)基中，在溫度為21±1℃的環(huán)境中進(jìn)行暗培養(yǎng)至出現(xiàn)胚性愈傷組織；二、將胚性愈傷組織轉(zhuǎn)培養(yǎng)接種于額外添加脫落酸、谷氨酰胺、水解酪蛋白、蔗糖和膠立得的改良RJW培養(yǎng)基中，在溫度為21±1℃的環(huán)境中進(jìn)行暗培養(yǎng)至體細(xì)胞胚成熟，待體細(xì)胞胚子葉發(fā)育完全后，將培養(yǎng)瓶開蓋，在超凈工作臺(tái)內(nèi)選弱風(fēng)檔，用弱風(fēng)吹5～7天進(jìn)行干燥處理；三、干燥處理后的成熟體細(xì)胞胚轉(zhuǎn)接到額外添加激動(dòng)素、萘乙酸、膠立得和蔗糖的改良RJW培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在溫度為24±1℃、光周期是明16h/暗8h的環(huán)境中培養(yǎng)至體細(xì)胞胚萌發(fā)；四、將萌發(fā)的體細(xì)胞胚轉(zhuǎn)接到額外添加活性炭的1/2改良RJW培養(yǎng)基中，在溫度為24±1℃、明16h暗8h交替的環(huán)境中培養(yǎng)至根和莖的形成，即得到紅皮云杉再生植株；步驟一改良RJW培養(yǎng)基中6-芐基氨基嘌呤的濃度為0.0～1.0mg/L、激動(dòng)素的濃度為0.0～1.0mg/L、萘乙酸的濃度為0.0～5.0mg/L、谷氨酰胺的濃度為450mg/L、水解酪蛋白的濃度為750mg/L、蔗糖的濃度為20g/L、膠立得的濃度為2g/L；步驟二改良RJW培養(yǎng)基中脫落酸的濃度為0.0～9.5mg/L、谷氨酰胺的濃度為450mg/L、水解酪蛋白的濃度為500mg/L、蔗糖的濃度為60g/L、膠立得的濃度為2g/L；步驟三改良RJW培養(yǎng)基中激動(dòng)素的濃度為0.02mg/L、萘乙酸的濃度為0.05mg/L、膠立得的濃度為2g/L、蔗糖的濃度為25g/L；步驟四1/2改良RJW培養(yǎng)基中活性炭的濃度為3g/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紅皮云杉體細(xì)胞胚誘導(dǎo)植株再生的方法，其特征在于步驟二中在超凈工作臺(tái)內(nèi)選弱風(fēng)檔，用弱風(fēng)吹6天進(jìn)行干燥處理。