[發明專利]一種示蹤食品致病性細菌生長的檢測方法

無效

• 申請號: 200810063192.5
• 申請日: 2008-07-28
• 公開（公告）號: CN101339153A
• 公開（公告）日: 2009-01-07
• 發明（設計）人: 趙廣英;黃建鋒;鄧少平;田師一
• 申請（專利權）人: 浙江工商大學
• 主分類號: G01N27/27
• 分類號: G01N27/27;C12Q1/02
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司
• 代理人: 徐關壽

1.一種示蹤食品致病菌生長的檢測方法，所述食品致病菌為金黃色葡萄球菌；其特征在于包括以下步驟：

a.?將金黃色葡萄球菌菌種接種于1%葡萄糖肉湯培養基中，靜止培養18小時，制備種子液；

b.?將種子液分別等量轉接于裝有50ml?1%葡萄糖肉湯培養基的三角瓶中，分別培養0h、1h、2?h、3?h、4?h、5?h、6?h、7?h、8?h、9?h、10?h、11?h、12?h、13?h、24?h、30?h后，對培養液100℃、40min水浴滅活；

c.?用多頻大幅脈沖智能化學分析系統對滅活后的培養液進行檢測；傳感器陣列采用鎢電極、鉑電極、鈦電極、銀電極為工作電極，鉑電極作為輔助電極，Ag/AgCl作為參比電極；多頻大幅脈沖激發電壓的脈沖頻率由1?Hz、10?Hz和100?Hz三個脈沖頻率組成，分別相當于脈沖時間間隔為1?s、0.1?s、0.01?s的大幅脈沖伏安法；所述三個脈沖頻率的大幅脈沖的脈沖幅度均采用相同脈沖幅度變化，從1.0?V開始，然后每次變化0.2V一直到-1.0?V；在所述三個脈沖頻率的兩個不同的頻率之間插入5s時間間隔；

d.?將多頻大幅脈沖智能化學分析系統的傳感器陣列放入培養0h、1h、2?h、3?h、4?h、5?h、6?h、7?h、8?h、9?h、10?h、11?h、12?h、13?h、24?h、30?h后并已滅活的培養液中，在工作電極上施加電壓，對傳感器陣列中的每個工作電極進行一次脈沖序列；所述脈沖序列的頻率為1?Hz、10?Hz和100?Hz；

e.?用主成分分析方法對多頻大幅脈沖智能化學分析系統采集的數據進行處理，提取電流采集信號的頂點和拐點值作為檢測樣品的變量，通過主成分分析方法獲得的得分圖，對不同的檢測樣品進行區分、識別，確定鎢電極100Hz頻率、鉑電極1Hz頻率、銀電極10Hz頻率、鈦電極10Hz頻率作為監測金黃色葡萄球菌生長狀況的監測系統。