[發(fā)明專利]L-氨基酸衍生物的生物催化制備方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810062997.8
• 申請(qǐng)日: 2008-07-11
• 公開（公告）號(hào): CN101423861A
• 公開（公告）日: 2009-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張子張;郭紅纓
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué);杭州慧根藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12P41/00
• 分類號(hào): C12P41/00;C12P13/04;C12P13/22;C12R1/01
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 張法高;趙杭麗

1.一種L-氨基酸的生物催化制備方法，其特征是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：在搖瓶中，放置100ml培養(yǎng)基，接種細(xì)菌為氣單胞菌(Aeromonas?sp)，生長24小時(shí)后，離心，傾出清液，置回?fù)u瓶中，每瓶中加入相同量消旋體D，L-氨基酸50mg，調(diào)pH7.3，通空氣，透氣封口，放回在控溫?fù)u床中，圓周式搖動(dòng)，生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)時(shí)間4-40小時(shí)，采樣，超濾、稀釋，注入HPLC進(jìn)行分析追蹤轉(zhuǎn)化進(jìn)程，用大賽路冠醚手性色譜柱分析，分析時(shí)間控制在到120分鐘，確定獲得目的產(chǎn)物，所述氣單胞菌的保藏編號(hào)為CGMCC?2226，所述L-氨基酸為L-苯丙氨酸，L-4-氟-苯丙氨酸，L-2-氯-苯丙氨酸，L-4-氯-苯丙氨酸，L-2，4-二氯-苯丙氨酸，L-3，4-二氯-苯丙氨酸，L-2-溴-苯丙氨酸，L-4-溴-苯丙氨酸，L-4-甲基-苯丙氨酸，L-4-硝基-苯丙氨酸，L-4-羥基-苯丙氨酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種L-氨基酸的生物催化制備方法，其特征是：所述的HPLC進(jìn)行分析追蹤轉(zhuǎn)化進(jìn)程，是找到消旋體底物的兩個(gè)等比信號(hào)峰的消耗跟蹤反應(yīng)進(jìn)程，當(dāng)信號(hào)超出檢測靈敏限度后，停止反應(yīng)，反應(yīng)混合物經(jīng)離心收取清液，通過離子交換樹脂柱分離，得到產(chǎn)物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種L-氨基酸的生物催化制備方法，其特征是：培養(yǎng)基選用營養(yǎng)肉汁瓊脂，組成為：蛋白胨10克，牛肉提取物3克，瓊脂15克，NaCl?5克，蒸餾水1000毫升。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種L-氨基酸的生物催化制備方法，其特征是：采用階段性的采樣，選用0小時(shí)，6小時(shí)和12小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種L-氨基酸的生物催化制備方法，其特征是：所用大賽路冠醚手性色譜柱為Crownpak?CR(+)。