[發明專利]一種產角蛋白酶復合酶的宇佐美曲霉及其發酵產酶方法

無效

• 申請號: 200810062738.5
• 申請日: 2008-07-01
• 公開（公告）號: CN101338280A
• 公開（公告）日: 2009-01-07
• 發明（設計）人: 李永泉;沙興寶;呂龍賢;倪利強
• 申請（專利權）人: 浙江大學;浙江雀屏紡織化工股份有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/62;C12R1/66
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 張法高

技術領域

本發明涉及微生物工程技術領域，特別涉及一種產角蛋白酶復合酶的宇佐美曲霉及其發酵產酶方法。

背景技術

角蛋白酶復合酶的主要成份為角蛋白酶和普通蛋白水解酶，能夠比角蛋白酶更加快速高效地水解角蛋白，在飼料生產、鞣革、羊毛處理等工業具有廣泛地應用。該法生產的飼料節約能源、成本低、質量好，能夠較好的被動物利用。在含角蛋白的飼料中，添加角蛋白酶復合酶也可以提高動物對角蛋白的吸收利用，提高經濟效益。角蛋白酶復合酶能夠選擇性的水解羊毛、皮革表面的角蛋白，有望取代傳統的羊毛剝鱗和鞣革工藝，實現傳統產業的綠色環保改造。角蛋白酶復合酶能改善化妝品、外用藥物在皮膚中的通透性，在醫藥、化妝品等工業也都有著廣泛的應用前景。傳統方法單獨生產角蛋白酶和蛋白水解酶，然后將它們復合在一起，生產過程復雜、成本相對較高。

宇佐美曲霉Aspergillus?usami?L88，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號是CGMCC?No.2296。

發明內容

本發明的目的是提供一種產角蛋白酶復合酶的宇佐美曲霉及其發酵產酶方法。

產角蛋白酶復合酶的宇佐美曲霉Aspergillus?usami?L88，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號是CGMCC?No.2296。

所述的宇佐美曲霉形態學特征為：菌絲褐色或褐黑色，小梗2層；分生孢子褐色或褐黑色，粗糙或平滑，一般大而呈球形，有時不發達。

所述的宇佐美曲霉的5.8S核糖體具有SEQ?ID?NO.1的DNA序列，

產角蛋白酶復合酶的宇佐美曲霉的發酵產酶方法包括如下步驟：

1)將宇佐美曲霉L88接種到斜面培養基上，于20～37℃培養72～360小時，得到表面覆蓋大量孢子的斜面；斜面培養基成份為：每1000毫升中含麥芽汁100～900毫升、瓊脂粉10～20克和水100～900毫升；

2)將宇佐美曲霉L88孢子接種到液體種子培養基中，于20～37℃，80～220rpm條件下培養20～72小時，得到發酵種子；種子培養基成份為：每1000毫升中含玉米粉10～30克、大豆粉20～60克、氯化銨5～30克、磷酸氫二鈉3～15克、氯化鈣3～15克、魚粉5～40克，蠶蛹水解液10～100毫升，角蛋白0.1～20克；

3)將發酵種子按發酵培養基體積的3～15％接入發酵罐中，罐溫20～37℃、罐壓0.2～1.0kg/cm²，攪拌速率80～220rpm，通氣量為1∶0.5～1∶2，發酵培養時間72～360小時，發酵培養基成份為：每1000毫升中含玉米粉10～30克、大豆粉20～60克、氯化銨5～30克、磷酸氫二鈉3～15克、氯化鈣3～15克、魚粉5～40克，蠶蛹水解液10～100毫升，角蛋白0.1～20克；

4)發酵開始40～150小時后，將占發酵液起始體積5～20％的補料培養基，在0.1～8小時內持續補充到發酵培養基中，補料培養基成份為每1000毫升中含蠶蛹水解液10～990毫升，水10～990毫升。

本發明與現有技術相比具有的有益效果：

1)本發明能夠一次性生產角蛋白酶和蛋白水解酶的復合酶，具有生產過程簡單、成本低；所得復合酶的相容性好、能避免由于復合酶之間反應造成的酶活降低甚至失活。

2)本發明中的發酵培養基，營養成分配比合理，能夠保證宇佐美曲霉L88的生長和高產酸性蛋白酶需要，又能誘導出大量的角蛋白酶，從而生產出比例合理，催化能力強的角蛋白酶復合酶。

3)本發明的發酵過程中利用了對環保不利的角蛋白為底物，成本低，在產角蛋白酶的同時又能解決環境問題，降解后的角蛋白用于飼料等行業可產生較高的經濟價值。

4)本發明生產的角蛋白酶復合酶，用于羊毛后整理工業時，能有有效避免環境污染，防氈縮效果好，產品色澤鮮艷，市場占有率高。

5)本發明生產的角蛋白酶復合酶，用于角蛋白廢棄物處理時，角蛋白降解速度快、降解率高、氨基酸破壞程度低、營養成份均一，易于被動物吸收和利用。

具體實施方式

下面結合具體實施例來進一步詳細描述本發明。

實施例1

所述的宇佐美曲霉形態學特征為：菌絲褐色或褐黑色，小梗2層；分生孢子褐色褐黑色，粗糙或平滑，一般大而呈球形，有時不發達。

所述的宇佐美曲霉的5.8S核糖體具有SEQ?ID?NO.1的DNA序列。