[發明專利]食物過敏原特異性IgG4抗體ELISA檢測試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 200810060570.4
• 申請日: 2008-03-28
• 公開（公告）號: CN101256186A
• 公開（公告）日: 2008-09-03
• 發明（設計）人: 吳善東
• 申請（專利權）人: 杭州浙大生科生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/535
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 韓介梅

1、食物過敏原特異性IgG4抗體ELISA檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒組成包括已包被的奶類、蛋類、肉類、谷物類、堅果類、水果類、蔬菜類、水產類、豆類食物過敏原蛋白酶標板、人IgG4標準液、酶標記抗體、TMB底物顯色液、樣品稀釋液、濃縮洗滌液和終止反應液；

其中：

已包被的奶類食物過敏原蛋白的酶標板包括：牛奶、羊奶；

已包被的蛋類食物過敏原蛋白的酶標板包括：家禽蛋白、家禽蛋黃；

已包被的肉類食物過敏原蛋白的酶標板包括：豬肉、牛肉、羊肉、鴨肉、雞肉、鵝肉；

已包被的谷物類食物過敏原蛋白的酶標板包括：玉米、小麥、燕麥、大麥、蕎麥、大米、小米；

已包被的堅果類食物過敏原蛋白的酶標板包括：杏仁、花生、榛子、腰果、核桃、開心果、巴西堅果、芝麻；

已包被的水果類食物過敏原蛋白的酶標板包括：西瓜、菠蘿、橙子、芒果、香蕉、柑桔、胡柚、檸檬、蘋果、葡萄、梨、草莓、桃；

已包被的蔬菜類食物過敏原蛋白的酶標板包括：芹菜、菠菜、洋蔥、茄子、大蒜、辣椒、土豆、西紅柿；

已包被的水產類食物過敏原蛋白的酶標板包括：帶魚、黃魚、比目魚、三文魚；鯉魚、鯽魚、草魚、鰱魚、蝦、蟹、蚌、貽貝、牡蠣、黃鱔、鰻魚；

已包被的豆類食物過敏原蛋白的酶標板包括：扁豆、蠶豆、黃豆、豌豆；

酶標記抗體：辣根過氧化物酶標記的抗人IgG4單克隆抗體；

TMB底物顯色液：2.08mmol/L?3，3’，5，5’-四甲基聯苯胺，12mmol/L過氧化氫，10mmol/L?β-環糊精，0.1mol/L?pH5.0的醋酸緩沖液。

樣品稀釋液：10mmol/L?pH7.4-7.6的磷酸鹽緩沖液中含1％BSA，0.05％Tween-20和1mg/L慶大霉素；

濃縮洗滌液：0.1mol/L?pH7.4-7.6的磷酸鹽緩沖液中含1％胎牛血清，0.5％Tween-20和20mg/L慶大霉素；

終止反應液：1.0mol/L?H₂SO₄。

2、根據權利要求1所述的食物過敏原特異性IgG4抗體ELISA檢測試劑盒，其特征在于所說的酶標板為96孔。

3.權利要求1所述的食物過敏原特異性IgG4抗體ELISA檢測試劑盒的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)食物過敏原蛋白的制備：將含過敏原蛋白的食物材料經粉碎、脫脂、提取、SDS-PAGE電泳確證、洗脫、干燥；

(2)酶標記抗體的制備：用辣根過氧化物酶標記純化的抗人IgG4抗體；

(3)配制人IgG4標準液、TMB底物顯色液、濃縮洗滌液和終止反應液；

(4)酶標板包被：用抗人IgG4抗體和食物過敏原蛋白包被酶標板，并封閉。