[發(fā)明專利]一種制備T載體的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810059986.4 | 申請日： | 2008-03-07 |
| 公開（公告）號： | CN101240286A | 公開（公告）日： | 2008-08-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 周耐明;李果 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/63 | 分類號： | C12N15/63;C12N15/64;C12N15/66 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人： | 胡紅娟 |
| 地址： | 310058浙江省杭州*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 制備 載體 方法 | ||
1.一種制備T載體的方法，包括以下步驟：
(1)在出發(fā)載體上插入XcmI和BfuI串聯(lián)體盒，制備前T載體；
(2)用XcmI酶切前T載體，制得成熟的T載體；
所述的XcmI和BfuI串聯(lián)體盒包括間隔序列、緊密連接于間隔序列兩側(cè)的各一個XcmI和BfuI串聯(lián)識別序列，
所述的間隔序列為不含XcmI識別位點的任意DNA片段，
所述的XcmI和BfuI串聯(lián)識別序列為GTATCCANNNNNNNNNTGG，N為任意堿基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的出發(fā)載體為pBlueScript?II?SK、pBlueScript?II?KS、pUC18、pUC19、pUC118或pUC119。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述的出發(fā)載體為pUC19。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述的pUC19的多克隆位點只保留HindIII和ECoRI酶切位點。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述步驟(1)中的XcmI和BfuI串聯(lián)體盒插入HindIII和ECoRI酶切位點之間。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的間隔序列堿基數(shù)為3n個，n為自然數(shù)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的間隔序列為人組胺受體hH4基因。
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