[發明專利]一種黑金絲柚木的快速繁殖方法

無效

• 申請號: 200810058972.0
• 申請日: 2008-09-26
• 公開（公告）號: CN101385440A
• 公開（公告）日: 2009-03-18
• 發明（設計）人: 唐壽賢;吳挺波;鄒壽青;刀祥生;楊婷婷;李揚蘋
• 申請（專利權）人: 中國科學院西雙版納熱帶植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 云南協立專利事務所
• 代理人: 謝 嘉

1.一種黑金絲柚木的快速繁殖方法，該方法采用下述順序的步驟：

(1)采集枝條：于每年的3～8月份，采集當年生的帶梢枝條，長度為9～11厘米；

(2)枝條處理：在2～6小時內將采集到的枝條，用自來水不間斷地沖冼30min，然后除去葉片，將枝條切成長5cm的莖尖或莖段，得到外植體；

(3)消毒處理：將外植體先用無菌水漂冼2～3次，接著用70％的酒精表面消毒30s，再用無菌水漂洗兩次，然后置于0.2％的升汞溶液中浸泡15～20min，所述的升汞溶液中加入1～2滴的吐溫-80，取出后，用無菌水蕩洗6～8次；

(4)在無菌條件下將消毒處理后的外植體切成長1.5～2cm，直徑0.5～1.5cm的塊狀；

(5)誘導培養：將塊狀的外植體接入誘導培養基中培養，培養基的pH值為5.8～6.0，培養室內溫度為30±2℃，光照強度為1200lx，光照時間為12h/d，誘導培養過程中，外植體逐漸分化出多個不定芽，當不定芽長到6～8cm高度時，進行增殖培養；

(6)增殖培養：將不定芽分割為1～2cm長的莖段，然后轉到增殖培養基中培養，培養室溫度為30±2℃，光照強度1200lx，光照時間為12h/d；增殖培養過程中，莖段基部切口處開始膨大，并不斷產生愈傷組織，然后從基部抽出2～3個不定芽，同時很快長出葉片，形成小植株；將小植株切割成長1cm的莖段，轉接在同樣的培養基上進行培養；每隔25～30天繼代培養一次；經5～10次繼代培養后進行生根培養；

(7)生根培養：切取長2～3cm的增殖芽，接種到培養瓶中的生根培養基上進行誘導生根培養，培養溫度為30±2℃，光照強度為1200lx，光照時間12h/d；增殖芽培養10天以后，基部可見白色突起的根瘤，15天后生長為明顯的白色幼根，1個月后，苗高達到6～9cm，根也伸長至3～4cm，并生長出側根或根毛，此時提高光照度為1400lx；當小苗長成濃綠色的健壯苗時，移出培養室進行煉苗；

(8)煉苗：先將培養瓶連同苗從培養室內移出，置于光照強度為4000～8000lx、溫度28～30℃的環境條件下鍛煉7～10天，然后打開瓶蓋，加入20～30g的水，攪動培養基，用鑷子取出苗，洗凈附著于小苗根部的培養基，再置于500倍液的多菌靈溶液中10～15min，或置于0.1％的高錳酸鉀溶液中3～5min；取出后冼凈，然后移栽到苗床中的營養土內培育裸根苗或袋裝苗；

(9)苗床管理：移栽后立即淋透水，并覆蓋薄膜保濕，加蓋蔭蔽度為80％～90％的遮陽網，噴霧保濕，5天后用多菌靈800～1000倍液噴霧預防病害；移栽后20～30天，解除薄膜，使幼苗慢慢地適應自然條件下生長；苗木長出2～3對新葉時，解除遮陽網，用氮、磷、鉀復合肥施肥，當苗木高度達到30厘米以上時出圃種植；

其中，所述的誘導培養基的原料組成包括MS、6BA0.2mg/L、NAA0.01mg/L、瓊脂6000mg/L和蔗糖30000mg/L；所述的增殖培養基的原料組成包括MS、6BA0.1mg/L、NAA0.01mg/L、瓊脂6000mg/L和蔗糖30000mg/L；所述的生根培養基的原料組成包括1/2MS、NAA1mg/L、活性炭1000mg/L、瓊脂6000mg/L和蔗糖20000mg/L。

2.根據權利要求1所述的快速繁殖方法，其特征在于：所述的營養土配比按重量百分數為：腐質土85％，有機肥9％，血竭渣5％和鈣鎂磷1％。?