[發明專利]從孕婦羊水中提取抑瘤蛋白的方法

無效

• 申請號: 200810054758.8
• 申請日: 2008-04-10
• 公開（公告）號: CN101250216A
• 公開（公告）日: 2008-08-27
• 發明（設計）人: 童興龍
• 申請（專利權）人: 童興龍
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 石家莊新世紀專利商標事務所有限公司
• 代理人: 董金國

1.從孕婦羊水中提取抑瘤蛋白的方法，其特征在于其方法步驟如下：

(1)收集羊水：

收集19～21周孕婦羊水，存于無菌器皿中待用；

(2)過濾羊水：

在-4℃條件下，用濾紙減壓過濾羊水；

(3)離心沉淀：

將過濾的羊水置入冰浴容器中，再取與羊水等倍體積的已冷卻至-20℃的丙酮，將丙酮緩慢加入冰浴容器中與羊水混合，并緩慢攪拌10～20min；將上述混合溶液置于低溫離心機中，速度8000r/min，離心14～16min，離心時溫度為-8℃，得到離心沉淀物；

(4)第一次減壓干燥：

將上述離心沉淀物在-10℃條件下，減壓干燥，得到第一次干燥蛋白粉；

(5)第一次透析：

取上述第一次干燥蛋白粉0.4～0.5g，置于截留分子量為10000Dalton的透析袋中，再加三蒸水4～5ml；

將上述透析袋置于透析槽中，再向透析槽中加90～100ml的三蒸水，透析2小時，操作溫度為-4℃；收集第一次透析液；

(6)第二次減壓干燥：

將上述第一次透析液在-10℃條件下，減壓干燥，得到第二次干燥蛋白粉；

(7)第二次透析：

取第二次干燥蛋白粉0.1g，加三蒸水3～5ml，然后將其置于截留分子量為3000Dalton的透析袋中；

將上述透析袋置于透析槽中，再向透析槽中加250～300ml三蒸水，透析1小時，操作溫度為-4℃；

(8)第三次減壓干燥：

將上述第二次透析袋中的液體在-10℃條件下，減壓干燥，即得抑瘤蛋白粗品，該抑瘤蛋白的分子量在3000～10000Dalton之間。

2.根據權利要求書中1所述的從孕婦羊水中提取抑瘤蛋白的方法，其特征在于在每次透析前，先用5％福爾馬林溶液將透析袋浸泡1小時，然后用三蒸水漂洗5次。