[發明專利]一種白僵菌及其制備2-香豆滿酮的方法無效
| 申請號: | 200810054719.8 | 申請日: | 2008-03-28 |
| 公開(公告)號: | CN101302478A | 公開(公告)日: | 2008-11-12 |
| 發明(設計)人: | 謝映平;樊金華;薛皎亮;李保珍 | 申請(專利權)人: | 山西大學 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;C12P7/62;A01P7/04;C12R1/645 |
| 代理公司: | 山西五維專利事務所(有限公司) | 代理人: | 楊耀田 |
| 地址: | 030006*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 白僵菌 及其 制備 香豆滿酮 方法 | ||
1.一種產2-香豆滿酮的白僵菌,卵孢白僵菌(Beauveria?tenella)CGMCC?NO.2382。
2.一種制備2-香豆滿酮的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)將保藏號為CGMCC?NO.2382的卵孢白僵菌菌種接入斜面培養基,在溫度20-27℃,相對濕度60-85%下培養7-10天,得到斜面菌種;
(2)將斜面菌種在無菌條件下接入裝有液體培養基的三角瓶中,在溫度20-27℃培養7-10天,得到種子液;
(3)將種子液接入裝有液體培養基的發酵罐中,在溫度20-27℃培養7-10天,得到菌種發酵液;
所述的固體斜面培養基的組分和配比:蛋白胨8-15g/L,酵母浸出膏8-15g/L,葡萄糖30-50g/L,瓊脂15-25g/L,蒸餾水定容;所述的液體培養基的組分和配比:蛋白胨8-15g/L,酵母浸出膏8-15g/L,葡萄糖30-50g/L,蒸餾水定容;
(4)將培養好的菌種發酵液在5000r/min下離心15-30min,除去菌絲體,將上清液在45-50℃下濃縮至原體積的1/4-1/5,室溫下加入3倍體積95%乙醇,靜置24h-36h,4000r/min下離心10-20min,去除沉淀,上清液脫醇后,加入1.5-2.5倍體積的乙酸乙酯,萃取三次,所得有機相濃縮干燥,得粗提物干粉;
(5)將粗提物干粉用常壓硅膠色譜進行分離,用乙酸乙酯/甲醇/水=170/10/5的流動相進行洗脫,自動分步收集,逐管點樣進行薄層分析,得到6組組分,取其中第6組組分即得到含有2-香豆滿酮的物質。
3.如權利要求2所述制備2-香豆滿酮的方法,其特征在于,所述的固體斜面培養基的組分和配比:蛋白胨10g/L,酵母浸出膏10g/L,葡萄糖40g/L,瓊脂20g/L,蒸餾水定容。
4.如權利要求2所述制備2-香豆滿酮的方法,其特征在于,所述的液體培養基的組分和配比:蛋白胨10g/L,酵母浸出膏10g/L,葡萄糖40g/L,蒸餾水定容。
5.如權利要求1所述的一種產2-香豆滿酮的白僵菌,用于防治松毛蟲。
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