[發明專利]雞白細胞介素-2長效劑型的制備方法

無效

• 申請號: 200810053408.X
• 申請日: 2008-06-03
• 公開（公告）號: CN101411867A
• 公開（公告）日: 2009-04-22
• 發明（設計）人: 田杏芳;王連民
• 申請（專利權）人: 天津生機集團股份有限公司
• 主分類號: A61K38/20
• 分類號: A61K38/20;A61K9/16;A61K47/42;A61K47/34;A61K47/36;A61P37/04;A61P31/12
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司
• 代理人: 劉英蘭

技術領域

本發明屬于生物藥物的制備技術，特別涉及一種雞白細胞介素-2長效劑型的制備方法。

背景技術

目前，雞白細胞介素-2作為一種免疫調節劑，已廣泛用于臨床。雞白細胞介素-2是一種天然免疫增強劑。它具有激活T細胞，促進和維持T細胞長期存活；促進B細胞分化及產生抗體、誘導干擾素產生等功能。重組雞白細胞介素2用于雞，對疫苗具有良好的免疫增強效果。它能克服了其它常規佐劑所引起的毒性大、難吸收的缺點，而且還可以克服某些疾病引起的免疫抑制狀態，減少養禽業中由于病原感染后引起的免疫抑制所導致的重大經濟損失。

近年來，免疫抑制病大面積流行已經成了畜禽養殖業的主要威脅之一。因此，雞白細胞介素-2等免疫調節因子受到了國內外學者的廣泛關注。在獸醫臨床試驗中，雞白細胞介素-2在動物疫病防治方面也取得了滿意的效果。

雞白細胞介素-2都是以注射的途徑給藥有較好的治療效果，多者每天需要注射1—2次，連用2-5天，給養殖業主的使用帶來很多不便，因此將其制成長效劑型便成為人們追求的目標。已有的雞白細胞介素-2存在需要長期頻繁注射、使用不便、生物利用度低以及藥物使用量大等缺陷。

因此，提供一種雞白細胞介素-2長效劑型的制備方法，有效預防和治療各種雞疾病，是該技術領域科研人員急需開發的新課題之一。

發明內容

本發明的目的是為克服已有技術的不足之處，提供一種制備簡單、應用方便、效果顯著的雞白細胞介素-2長效劑型的制備方法。

一種雞白細胞介素-2長效劑型的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)將一定量的雞白細胞介素-2溶解在含有穩定劑的PBS緩沖溶液，制成水相溶液(W1)，雞白細胞介素-2的含量為0.5—50毫克/毫升；

(2)將丙交脂/乙交脂共聚物用二氯甲烷溶解制成油相溶液(O)，丙交脂/乙交脂共聚物的含量為0.1—0.5克/毫升；將上述含雞白細胞介素-2的水相溶液(W1)加入到油相溶液(O)中，油相溶液(O)與水相溶液(W1)的比例為20∶1至2∶1，使這兩種溶液在溫度5—30℃下攪拌混合均勻，制成初乳W1/O，在4—10℃下保存；

(3)將聚乙烯醇充分溶解于水制成水相溶液(W2)，聚乙烯醇的重量濃度為0.5-50％；將上述初乳W1/O加入到水相溶液(W2)攪拌均勻，初乳W1/O與水相溶液(W2)的比例為1∶50至1∶200，制成復乳W1/O/W2，在4—10℃下保存；

(4)將復乳W1/O/W2轉移到NaCl水溶液中，攪拌均勻，使有機溶劑揮發，然后離心收集微球；

(5)所述步驟(2)中的攪拌溫度為5—30℃，攪拌速度為500—8000轉/分，攪拌時間為0.02—0.2小時；

(6)所述步驟(3)中的攪拌溫度為5—30℃，攪拌速度為100—3000轉/分，攪拌時間為0.2—0.5小時；

(7)所述步驟(4)中的攪拌溫度為5—30℃，攪拌速度為500—3000轉/分，攪拌時間為0.2—0.5小時；

(8)為了保持溶液的穩定，加入一定量的穩定劑，穩定劑直接加入到所述制備步驟(1)溶液中。

所述穩定劑選自海藻糖、牛血清白蛋白和聚乙二醇的一種或一種以上。

所述穩定劑的加入量為最終溶液的0.1％—10％。

所述雞白細胞介素-2為重組雞白細胞介素-2和雞天然白細胞介素-2。

本發明方法的有益效果是：該注射用雞白細胞介素-2長效劑型能夠減少雞白細胞介素-2用藥次數，是一種理想的雞白細胞介素-2長效劑型。具有制備工藝簡單，容易實現，應用方便，所需成本低等特點，該方法采用毒性小，注射安全的分散劑及油相等材料，使雞白細胞介素-2均勻的分散溶解到油相中，最終成為一種雞白細胞介素-2的長效劑型。采用該方法制成的雞白細胞介素-2的長效劑型體外實驗表明，用雞擾素為包裹對象，所制得的雞白細胞介素-2微球形態圓整，粒度分布均勻，粒徑分布在40微米以下，載藥量可達6.0％以上，包封率在30.0％以上，體外緩釋可以達4周釋藥，符合長效制劑特征。一次注射后能夠在較長時間內發揮抗病毒藥效。將雞白細胞介素-2做成微球制劑，可以延長藥物作用時間，大大提高藥物療效和經濟效益。

具體實施方式

以下結合實施例，對依據本發明提供的具體實施方式詳述如下：

實施例1

一種雞白細胞介素-2長效劑型的制備方法，其特征在于具體實施步驟如下：

(1)將60毫克雞基因工程白細胞介素-2溶解在1毫升含有2％的海藻糖的PBS緩沖溶液，制成水相溶液(W1)；