[發(fā)明專利]一種生物轉(zhuǎn)化二醇型人參皂甙Rb1的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810051621.7 | 申請日： | 2008-12-19 |
| 公開（公告）號： | CN101748183A | 公開（公告）日： | 2010-06-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 周義發(fā);臺桂花;趙雪淞;高娟;付玲;孫成新 | 申請（專利權(quán)）人： | 東北師范大學(xué) |
| 主分類號： | C12P33/00 | 分類號： | C12P33/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 130024 吉林*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物轉(zhuǎn)化 二醇型 人參 皂甙 rb1 方法 | ||
1.一種生物轉(zhuǎn)化人參皂甙Rb1制備Rd或者Rg3的方法，其特征在于利用番茄葉霉(Cladosporium?fulvum)水解人參皂甙Rb1，制備Rd或者Rg3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物轉(zhuǎn)化Rb1，制備Rd或者Rg3的方法，其特征在于包含以下主要步驟：
a)活化菌種：將番茄葉霉(Cladosporium?fulvum)無菌操作接種于V-8汁固體培養(yǎng)基，25℃恒溫暗培養(yǎng)5-10天。
b)刮取孢子：無菌條件下，刮下平板上的菌絲和孢子，用無菌水沖洗平板若干次，將菌絲及孢子全部轉(zhuǎn)移到無菌水中；向含有菌絲及孢子的無菌水中加入玻璃珠，室溫振蕩1-2h，使孢子充分分散；四層紗布過濾，濾液離心，棄去上清，得到孢子(沉淀)。
c)液體培養(yǎng)：將孢子加入到V-8液體培養(yǎng)基(不含瓊脂)中，28℃、150rpm恒溫振蕩培養(yǎng)。
d)濾取新生菌絲：將液體培養(yǎng)48h-72h的孢子懸液用四層紗布過濾，得到新生菌絲。
e)生物轉(zhuǎn)化：將新生菌絲加入到含有人參皂甙的醋酸緩沖液中，28℃恒溫振蕩培養(yǎng)；每隔24小時取出1組轉(zhuǎn)化液離心，棄去菌體，取上清液加水飽和正丁醇終止反應(yīng)。
f)回收皂甙：用正丁醇終止反應(yīng)，同時皂甙產(chǎn)物被萃取至有機(jī)層中；將有機(jī)層水浴蒸干，然后用乙睛(乙睛∶水＝35∶65)溶解，進(jìn)行柱層析分離制備稀有人參皂甙純品。
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