[發明專利]MUC1串聯重復序列多肽及其制備工藝以及作為抗腫瘤藥物的應用無效
| 申請號: | 200810051351.X | 申請日: | 2008-10-29 |
| 公開(公告)號: | CN101412749A | 公開(公告)日: | 2009-04-22 |
| 發明(設計)人: | 臺桂香;柳忠輝 | 申請(專利權)人: | 臺桂香 |
| 主分類號: | C07K7/08 | 分類號: | C07K7/08;C07K14/47;C12N15/12;C12N15/70;A61K38/10;A61K38/17;A61P35/00 |
| 代理公司: | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 | 代理人: | 陳宏偉 |
| 地址: | 130021吉*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | muc1 串聯 重復 序列 多肽 及其 制備 工藝 以及 作為 腫瘤 藥物 應用 | ||
1、MUC1串聯重復序列多肽,為MUC1多肽骨架的20個氨基 酸串聯重復序列,由1~10個串聯重復序列組成,分子量為1.87KD~ 18.7KD;
串聯重復的20個氨基酸序列:SAPDTRPAPGSTAPPAHGVT
串聯重復可從上述排列中任何一個氨基酸起始合成。
2、權利要求1所述的MUC1串聯重復序列多肽的制備工藝,包 括以下步驟:
采用MUC120個氨基酸的串聯重復序列,選擇1~10個串聯重復 序列的cDNA片段連入pGEX-4T-1載體,然后將重組質粒轉化大腸桿 菌DH5α;經氨芐青霉素篩選轉化菌落,通過酶切及基因測序分析插 入片段;將重組質粒轉化大腸桿菌DH5α,通過0.3mM?IPTG誘導表 達,通過篩選獲得穩定的表達菌株pGEX-MUC1/DH5α;煮沸裂解少量 細菌,經10%SDS-PAGE分析MUC1-GST融合蛋白的表達,通過Western blotting鑒定特異的表達條帶;大量培養的工程菌,超聲破碎后留 取上清通過Glutathione--Sepharose?4B親和層純化人MUC1-GST融 合蛋白;再通過凝血酶裂解獲得純的MUC1多肽,將MUC1多肽做成藥 物制劑。
3、MUC1串聯重復序列多肽在制備抗腫瘤藥物中的應用。
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