[發(fā)明專利]隱孢子蟲屬及微小隱孢子蟲種特異PCR檢測試劑盒及檢測方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200810050956.7 | 申請日： | 2008-07-11 |
| 公開（公告）號： | CN101353690A | 公開（公告）日： | 2009-01-28 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張西臣;李建華;李巍;宮鵬濤;張國才;楊舉;李淑紅 | 申請（專利權）人： | 吉林大學 |
| 主分類號： | C12Q1/04 | 分類號： | C12Q1/04;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 | 代理人： | 陳宏偉 |
| 地址： | 130062吉*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 孢子 微小 特異 pcr 檢測 試劑盒 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種隱孢子蟲屬及微小隱孢子蟲種特異PCR檢測試劑盒，包括以下部分：
(1)DNA裂解液：含不同濃度的NaCl、Tris-HCl、EDTA、SDS和蛋白酶K的混合溶液；各濃度配比為：NaCl?100mM、Tris-HCl(pH7.5)20Mm、EDTA25?Mm、SDS?2％(w/v)和蛋白酶K?0.1μg/μl；
(2)PCR反應液：終濃度各100-300μM的4種dNTPs，終濃度各0.5-3pmol/μl的引物CF、CR、HF和HR，1.5-4.5mM的Mg2+濃度；Taq酶按每個PCR反應(20μl)含2.0U加入，反應液中不含Taq酶；
(3)隱孢子蟲屬和微小隱孢子蟲種特異性引物：
屬特異性診斷引物：CF：5’-ATTGGAGGTTGTTCCTTACTCCT-3’
CR：5’-AGCCGCCCATAGAATCAAGAA-3’
種特異性診斷引物：HF：5′-TAAGAAGCCACCAAGAAGGCG-3′
HR：5′-TCAATAGGCTTAAATGGGTTCGGGA-3
(4)陽性對照：陽性對照為微小隱孢子蟲基因組DNA。
2.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其中PCR反應液中4種dNTPs的終濃度為各250μM，引物HF、HR和CF、CR和終濃度各為0.5pmol/μl，Mg2+終濃度為1.5mM。
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