[發明專利]一種利用蚯蚓腸道活性酶酶解魚蛋白生產活性肽的方法

有效

• 申請號: 200810047988.1
• 申請日: 2008-06-12
• 公開（公告）號: CN101297672A
• 公開（公告）日: 2008-11-05
• 發明（設計）人: 萬端極;徐國念;何昌義;李猷;袁潤蕾
• 申請（專利權）人: 武漢賽普膜技術有限公司
• 主分類號: A23J3/04
• 分類號: A23J3/04;A23J3/34;A23L1/29;A23L1/305;A61K38/02;A61P37/02;A61P9/10;A61P3/06;A61P39/06;A61P35/00;A61Q1/00;A61K8/64
• 代理公司: 武漢開元專利代理有限責任公司
• 代理人: 唐正玉

技術領域

本發明涉及酶解魚蛋白生產活性肽的方法，尤其涉及一種利用蚯蚓腸道活性酶酶解魚蛋白生產活性肽的方法。

技術背景

活性肽是介于氨基酸與蛋白質之間的分子聚合物。由兩個或兩個以上的氨基酸通過肽鍵連接而成。

活性肽對人的機體生理作用主要體現在：免疫調節、抗高血壓、降低血脂、抗氧化、抗疲勞、抑制腫瘤等方面，可廣泛應用于藥品、食品、保健、化妝等領域，在發達國家和地區已經形成巨大的消費市場。

活性肽的主要來源可分為天然存在的活性肽，人工合成的活性肽和蛋白質水解產生的活性肽。天然活性肽分布于陸地和海洋生物體中，含量甚微，提取困難，不易實現產業化。人工合成技術要求高，成本昂貴，實際使用價值低。蛋白質水解有化學法和酶法之分。化學法以酸或堿斷開蛋白質的肽鍵，由于反應環境極端，不利于活性保持；而酶解蛋白質生產活性肽的安全性卻很高，能在溫和條件下定位水解分裂產生特定的肽，且水解過程易控制，因而近幾年報道的活性肽制備方法均為酶解法。酶的選擇是酶解法生產活性肽的關鍵，目前主流的生產工藝都是采用各種蛋白酶，由于蛋白酶價格較高，造成活性肽生產成本難以下降。因此尋找一種低成本的酶用于酶解蛋白質生產活性肽具有十分重要的意義。

蚯蚓是一種蛋白質含量達70％的軟體多汁動物，喜食腐質有機物。其腸道中含有蛋白酶、脂肪酶、纖維酶、淀粉酶等多種活性酶，可將腐質有機物酶解后轉化成自身或其它生物易于利用的活性物質，同時產生蛋白質和氨基酸，具有較高的經濟價值和藥用價值。我國傳統醫學早已將蚯蚓入藥，用于治療各種相關疾病。近些年來，科學界利用蚯蚓的特性，在環保、醫藥、飼料、肥料、保健品、化妝品等方面開展了廣泛深入的研究，取得了很多成果，蚯蚓的利用受到極大的關注。

發明內容

本發明目的就是利用蚯蚓腸道分泌的活性酶酶解魚蛋白，并將魚蛋白轉化為活性蛋白肽，而提出一種利用鮮活蚯蚓腸道活性酶酶解魚蛋白生產活性蛋白肽的方法。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：

一種用鮮活蚯蚓腸道活性酶酶解魚蛋白生產活性肽的方法，其特征在于：按以下步驟進行：(1)將蚯蚓洗凈、搗碎、勻漿，加水稀釋，蚯蚓量與加入的水量(w/w)比為1∶5～40，調PH值5.0～8.5，超聲波提取和冷凍離心10分鐘得上清液為活性酶液；超聲波功率為300W，超聲時間為100～400s，冷凍離心機為3500r/min；(2)按常規方法取活性酶液與魚蛋白混勻酶解，再經滅酶、脫色、膜精制、濃縮、噴霧干燥，得到小分子活性肽，加入活性酶的量為蚯蚓量與魚重量比(w/w)為4‰～12‰∶1。

在上述方案中，提取活性酶的PH值為5.5～7.0。

在上述方案中，提取活性酶時，蚯蚓量與加入的水量(w/w)比為1∶10～20。

在上述方案中，提取活性酶時，超聲波提取時間為200～300s。

在上述方案中，酶解魚蛋白時，加入活性酶的量為蚯蚓量與魚重量比(w/w)為6‰～7‰∶1。

本發明采用蚯蚓腸道活性酶酶解魚蛋白方法，可大幅度降低生產成本，酶解度達64％以上，適用于工業化生產。

具體實施方式

實施例1

稱取1000g蚯蚓，進行搗碎、勻漿預處理，添加10kg水，拌勻，調PH值為5.5～6.5，在超聲波功率為300W，超聲波提取300s，放入3500r/min控溫離心機中離心10min，取上清液活性酶液放入冰箱中備用；

稱取1kg鰱魚，將鰱魚粉碎、勻漿，按蚯蚓量∶魚量(w/w)為＝6‰∶1取活性酶液66g加入魚漿中對魚蛋白進行酶解，再經90℃，30min滅酶、活性炭脫色、超濾膜精制、濃縮、干燥，得350g活性肽，產品色淺黃色，水溶性好，蛋白質含量75％，重金屬2ppm，其中超濾膜精制中的膜元件孔徑為10nm，工作壓力0.5MPa，工作溫度40℃。

實施例2

操作方法同實施例1，提取酶條件為PH7～7.5，其余同實施例1，得310g產品，產品色淺黃色，水溶，蛋白質含量72％，重金屬2.3ppm。

實施例3

操作方法同實施例1，提取酶條件稀釋用水量為20kg，按蚯蚓量∶魚量(w/w)為＝6‰∶1取活性酶液126g加入魚漿中對魚蛋白進行酶解，其它條件同實施例1，得產品重380g，產品呈淺黃色，水溶，蛋白質含量75％，重金屬1.8ppm。

實施例4

操作方法同實施例1，提取酶條件中超聲波提取200s，其它條件同實施例1，得產品重350g，產品呈淺黃色，水溶，蛋白質含量73％，重金屬1.9ppm。

實施例5