[發明專利]一種源于魚皮的ACE抑制肽的制備方法

無效

• 申請號: 200810046745.6
• 申請日: 2008-01-21
• 公開（公告）號: CN101240312A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發明（設計）人: 劉成梅;梁漢縈;劉偉;梁瑞紅;涂宗財
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14
• 代理公司: 南昌洪達專利事務所
• 代理人: 劉凌峰

1、一種源于魚皮的ACE抑制肽的制備方法，其特征是方法步驟為：

(1)預處理：清洗后的魚皮經脫脂后，依次用0.1mol/L的鹽酸溶液和0.1mol/L的氫氧化鈉溶液浸泡1hr；

(2)水提：預處理后的魚皮經洗滌至中性后，在45℃條件下，用10倍體積的蒸餾水恒溫勻漿12hr后，抽濾提取上清液；

(3)酶解：在一定條件下，采用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶進行酶解，比較兩種酶的酶解效果，并確定最佳酶解條件；

(4)滅酶：采用100℃，20min滅酶；

(5)脫苦、脫色、脫味：分別采用活性炭和復合脫色劑對酶解液進行脫苦、脫色、脫味處理，比較兩種方法的效果；

(6)過濾：酶解液經脫苦、脫色、脫味處理后，再經4000r/min離心過濾獲得清液；

(7)離子交換：取一定體積的超濾液在常溫下以8倍柱體積/h的流速通過732強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂，收集流出液，再將脫陽離子后的水解液以8倍柱體積/h的流速通過717強堿性I型陰離子交換樹脂，收集流出液；

(8)濃縮：使用旋轉蒸發儀，濃縮溫度為50℃，蒸發溶液至粘稠狀；

(9)超濾：選用中空纖維材料，超濾設備的工作壓力為28psi，膜滲透通量為9.98LHM，超濾處理時間為40min，進料溫度為29℃，料液pH值為6.7；

(10)凝膠色譜：收集超濾液進入凝膠色譜進行進一步分離純化，分離介質為SephadexG-15，色譜柱(1.6×60cm)，柱層析條件：上樣量：1.5ml；流速：0.8ml/min；洗脫劑：蒸餾水；檢測波長：220nm；

(11)冷凍干燥：高活性ACE抑制組分在-80℃預凍8hr后，真空冷凍干燥72hr，即得產品。