[發明專利]艾滋病(HIV-1/2)唾液快速檢測試劑

無效

• 申請號: 200810044991.8
• 申請日: 2008-03-17
• 公開（公告）號: CN101539575A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 陳潔
• 申請（專利權）人: 陳潔
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/571
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種艾滋病(HIV-1/2)唾液快速檢測試劑其特征是用于檢測唾液中艾滋病抗體，可用于臨床診斷。(1).以HIV重組抗原構建高靈敏度的雙抗原夾心法系統，用于檢測唾液中的特異性HIV抗體：高度純化的HIV重組抗原HIV-1?gp41、P24和HIV-2?gp36、高靈敏度的雙抗原夾心法系統構建。(2).抗HIV抗原HIV-1?gp41、P24和HIV-2?gp36單克隆抗體細胞株克隆、篩選、鑒定，大規模單克隆抗體細胞培養和收獲，以及單克隆抗體純化。(3).上述兩個檢測系統中金標記物的制備：高靈敏度的雙抗原夾心法系統和高靈敏度的雙抗體夾心法系統中金標記物的制備。(4).唾液的快速樣品濃縮技術：唾液作為待測樣品進行檢測時，由于唾液中含有的特異性抗體和抗原的含量要較血清或血漿少的多，這就需要該檢測系統的靈敏度更強。本項目使用的濃縮墊可使樣品在加樣瞬間濃縮10～100倍，從而提高檢測系統的敏感性。

2.原材料選擇與制造

(1)NC膜：選用美國Milipore或國產膜公司膜，膜孔徑(5-8)um。

(2)濾紙墊片：普通實驗用濾紙；

(3)樣品稀釋液：PBS緩沖液；

(4)抗原膠體金記物(HIV-1/2)重組蛋白抗原和抗HIV-1?gp41，P24和HIV-2?gp36單克隆抗體膠體金記物)；

特異性抗原：選用基因工程表達的重組蛋白HIV-1?gp41、P24和HIV-2?gp36作為固相抗原。

3.工藝過程和技術參數的確定

(1)艾滋病重組抗原(HIV-1?gp41、P24和HIV-2?gp36)和抗HIV-1?gp41，P24和HIV-2?gp36單克隆抗體的膠體金標記

(2)30～40nm膠體金溶液的制備；

(3)膠體金溶液結合重組抗原最佳濃度和量的選擇；

(4)試劑盒半成品和成品制備過程中需確定的主要技術參數

(5)抗原噴點濃度、體積和量；

(6)完成檢測步驟所需時間的確定。

4.最佳抗原噴點濃度和抗原膠體金標記物工作濃度

以標準陽性和陰性血清為測試樣品，在保證試劑盒性能(如靈敏度、特異性和精密度)前提下，采用方陣滴定選擇最佳包被抗原或抗體濃度、待測樣品稀釋濃度和膠體金記抗體相應的工作濃度，以及加樣體積。根據重復3次的測試結果，確定本試劑盒的配方、參數和條件。