[發明專利]二次高速逆流色譜分離射干中異黃酮類單體化合物的方法

無效

• 申請號: 200810042681.2
• 申請日: 2008-09-09
• 公開（公告）號: CN101357933A
• 公開（公告）日: 2009-02-04
• 發明（設計）人: 范國榮;周婷婷;馮超;謝瑛;聞俊;崔莉俊;陳丹霞;李霽;解蕊;魏華;張鶴
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07D311/36;A61K36/88
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司
• 代理人: 丁振英

1.一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

A、第一次高速逆流色譜分離純化：

構成高速逆流色譜固定相、流動相的溶劑體系為正己烷∶正丁醇∶甲醇∶水＝1∶4∶1.5～2∶6或乙酸乙酯∶正丁醇∶水＝2∶1∶3，在分液漏斗中充分振搖后靜止分層，上相為固定相，下相為流動相；先使逆流色譜儀柱子中充滿固定相，然后使主機轉動，再泵入流動相，取射干粗提物溶于少量上相和下相，由進樣閥進樣，根據檢測器譜圖接收流分“I”、“II”，見圖2；對高速逆流固定相液進行回收，揮干有機溶劑，得第一次高速逆流固定相揮干物；

B、第二次高速逆流色譜分離純化：

構成高速逆流色譜固定相、流動相的溶劑體系為氯仿∶甲醇∶水為4∶2.7～3∶2，對第一次高速逆流固定相揮干物進行第二次分離，分離方法同步驟A；根據檢測器譜圖接收流分“III”、“IV”和“V”，見圖4；

流分“I”為野鳶尾苷，流分“II”為鳶尾苷，流分“III”為次野鳶尾黃素，流分“IV”為野鳶尾黃素，流分“V”為鳶尾苷元。

2.根據權利要求1所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于第一次高速逆流色譜分離純化中的射干粗提物，是用以下方法制得的：將干燥射干粗粉以70％～100％乙醇水溶液超聲提取、微波提取或加熱回流提取1～2次，過濾并合并濾液，將濾液減壓濃縮至固形物。

3.根據權利要求2所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于其中的干燥射干粗粉以70％乙醇水溶液超聲提取。

4.根據權利要求1或2或3所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于第一次高速逆流色譜分離純化中構成高速逆流色譜固定相、流動相的溶劑體系為正己烷∶正丁醇∶甲醇∶水＝1∶4∶1.5∶6。

5.根據權利要求1或2或3所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于第一次高速逆流色譜分離純化中構成高速逆流色譜固定相、流動相的溶劑體系為正己烷∶正丁醇∶甲醇∶水＝1∶4∶2∶6。

6.根據權利要求1或2或3所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于第二次高速逆流色譜分離純化中構成高速逆流色譜固定相、流動相的溶劑體系為氯仿∶甲醇∶水為4∶2.7∶2。

7.根據權利要求1或2或3所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于第二次高速逆流色譜分離純化中構成高速逆流色譜固定相、流動相的溶劑體系為氯仿∶甲醇∶水為4∶3∶2。

8.根據權利要求1或2或3所述的一種從射干中分離純化單體化合物鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素的方法，其特征在于：在進樣量為200mg的射干粗提物的高速逆流色譜的色譜圖中，野鳶尾苷的保留時間范圍為200-220分鐘，鳶尾苷的保留時間范圍為235-260分鐘，次野鳶尾黃素的保留時間范圍為29-34分鐘，野鳶尾黃素的保留時間范圍為38-44分鐘，鳶尾苷元的保留時間范圍為54-60分鐘。