[發(fā)明專利]檢測結(jié)核分支桿菌抗體的膠體金試劑及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810041040.5
• 申請日: 2008-07-25
• 公開（公告）號: CN101329340A
• 公開（公告）日: 2008-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐建新
• 申請（專利權(quán)）人: 上海奧普生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/532
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 黃志達(dá);謝文凱

1.一種檢測結(jié)核分支桿菌抗體的膠體金試劑，包括：

(1)TB抗原包被膠體金，抗原包被濃度為0.03～0.07mg/ml；

(2)質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為5～7％的蔗糖；

(3)2mg/ml?2，2’-[(1-甲基亞乙基)雙(4，1-亞苯基甲醛)]雙環(huán)氧烷聚乙二醇衍生化合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測結(jié)核分支桿菌抗體的膠體金試劑，其特征在于：所述TB抗原是結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv膜蛋白抗原，分子量為38Kda。

3.檢測結(jié)核分支桿菌抗體的膠體金試劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)制備TB抗原

結(jié)合桿菌H37Rv?36～37℃培養(yǎng)后，經(jīng)體積百分?jǐn)?shù)為5％的甲醛滅活，超聲裂解，經(jīng)表面活性劑抽提后，經(jīng)Sephadex?G-200分子篩純化得膜蛋白抗原；

(2)制備TB抗原包被膠體金

按常規(guī)制備空白的膠體金，以TB抗原包被膠體金，抗原包被濃度為0.03～0.07mg/ml，離心作結(jié)合/游離分離；

(3)制備膠體金溶液

離心作結(jié)合/游離分離后的TB抗原包被膠體金沉淀，用原體積1/5的10～20mM磷酸鹽緩沖液pH?7.4懸浮，其中，該緩沖液中含質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為5～7％的蔗糖和2mg/ml?2，2’-[(1-甲基亞乙基)雙(4，1-亞苯基甲醛)]雙環(huán)氧烷聚乙二醇衍生化合物；

(4)制備膠體金試劑

將膠體金溶液在-40℃預(yù)凍，即可。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測結(jié)核分支桿菌抗體的膠體金試劑的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中的表面活性劑是SDS或TritonX-100。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測結(jié)核分支桿菌抗體的膠體金試劑的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中的空白膠體金，在pH6.4～6.7時，粒徑是18～25nm，A₅₂₀nm＝0.85～1.30之間。