[發明專利]尿細胞微量染色分析方法

有效

• 申請號: 200810040597.7
• 申請日: 2008-07-15
• 公開（公告）號: CN101629946A
• 公開（公告）日: 2010-01-20
• 發明（設計）人: 彭艾;王力生;夏紅根
• 申請（專利權）人: 彭艾;王力生;夏紅根
• 主分類號: G01N33/493
• 分類號: G01N33/493;G01N1/30
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬醫學檢驗領域，涉及尿細胞微量染色分析。具體涉及一種包括支持微量 染色技術，防止樣本交叉污染，精確定量分析的尿沉渣分析方法。

技術背景

臨床檢驗實踐表明，尿沉渣成份復雜，常需采用有關的分析裝置進行尿沉渣的檢 測分析。迄今，尚未見現有技術的尿液沉渣分析儀開展對尿沉渣中的各組份進行分別 提取處理分析。由于這些現有分析儀進行染色時無法避免尿沉渣成份的相互影響、不 支持微量染色和薄層制片、染色誤差大、存在樣本的交叉污染，假陽性率高，常需手 工操作導致重復性差、耗時長，且無法進行精確定量計數以及染色條件無法標準化。 僅在特殊需求患者才進行尿沉渣的染色檢查，無法滿足臨床上大規模的尿沉渣染色檢 測。故，目前臨床尿沉渣的檢測分析主要停留在非染色、定性檢測水平上，尚無法進 行精確定量分析。由于臨床上腎臟細胞的脫落和白細胞滲出的臨床意義對于判定腎臟 疾病的活動和預后有重要的價值，然而，目前國內、外尚無針對尿細胞微量染色的定 量分析技術裝置。

英國Thermo?Shandon公司研制的Varistain?Gemini病理自動染片機，實現了組 織切片染色的自動化，亦可用于尿細胞染色。但是存在如下缺陷：單缸式設計無法避 免尿樣本的交叉污染；不能實施微量控制染液的劑量；染色為批量完成，同時僅能支 持一種染色，無法實現單樣本的個性化染色；操作中需常更換染液并清洗染液缸導致 大量染液的浪費；無自動定量計數程序，無廢水和有毒氣體的處理裝置，故該機僅適 合于小樣本的病理組織切片染色。

發明內容：

本發明的目的是為克服現有技術的缺陷，提供一種尿細胞微量染色分析系統。尤 其涉及一種尿細胞微量染色分析方法及其所涉及的分析裝置。

本發明結合計算機自動控制和識別技術提供了能為臨床上、大樣本、快速分析為 目的的尿細胞微量染色定量系統，該系統能實現尿沉渣的細胞分離、提取、薄層制片， 并支持單流程微量染色技術，防止樣本交叉污染以及精確定量分析和無染液環境污染。

本發明符合國際(NCCL)和中華醫學會檢驗分會制定的尿沉渣檢查標準化的要求。

本發明的目的通過以下技術方案實現：

1、提供一種尿細胞微量染色分析的方法，所述方法包括下述步驟：

1)待測尿樣本分離后進行尿細胞采樣，

待測尿樣本進入尿細胞梯度密度離心采樣裝置，通過尿樣本細胞分離器自動分 離后，轉入尿細胞采樣裝置，經密度梯度離心采集尿細胞液；

2)尿細胞制片，

采集的尿細胞液經稀釋后，移至自動制片裝置內自動甩片制片，

3)尿細胞片染片，

制得的尿細胞片移入細胞自動微量染色裝置在玻片染色控制軟件控制下進行 染片；

4)采集尿細胞染片圖像

尿細胞染片置入高分辨率彩色數字自動顯微鏡平臺，經自動顯微平臺控制軟件 控制，經顯微鏡、視頻高清晰度CCD圖像采集器傳送至LCD彩色顯示屏上得圖像，

5)尿細胞分類標記和圖像拍照，定性、定量分析，

步驟4)的尿細胞染片圖像經尿細胞圖像實時采集自動分析定量處理軟件選定 染色細胞區域后進行尿細胞分類標記和圖像拍照，自動進行定性、定量分析；

6)打印尿液檢驗結果圖文報告，資料分類管理

上述分析結果經尿液檢驗項目圖文報告打印軟件控制進行彩色打印，患者病 歷臨床資料經圖文數據庫管理軟件進行分類管理。

上述染色液和廢氣經處理裝置凈化后排出，其中的廢氣中苯濃度超標由報警軟 件控制自動報警。

2、提供所述的尿細胞微量染色分析系統所涉及的分析裝置，

所述的分析裝置包括尿樣本細胞分離裝置、尿細胞梯度密度離心采樣裝置、自 動鋪片裝置、自動染色裝置和染色液處理裝置、高清晰度CCD圖像采集器、高分辨率 彩色數字自動顯微鏡平臺和顯微鏡、計算機控制系統及控制軟件、LCD彩色顯示屏和彩 色打印機(圖1)。

所述的細胞分離裝置(圖2)由濾網灌注器[2]，濾網[3]和濾網支撐點[5]構成， 其中濾網為30～300目；當新鮮尿液經過濾網灌注器時，能分離尿沉渣管型、纖維素 等成份；