[發明專利]尿細胞微量染色分析方法

有效

• 申請號: 200810040597.7
• 申請日: 2008-07-15
• 公開（公告）號: CN101629946A
• 公開（公告）日: 2010-01-20
• 發明（設計）人: 彭艾;王力生;夏紅根
• 申請（專利權）人: 彭艾;王力生;夏紅根
• 主分類號: G01N33/493
• 分類號: G01N33/493;G01N1/30
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 吳桂琴

1.一種尿細胞微量染色分析裝置，其特征是所述分析裝置包括尿樣本細胞分離裝置、尿 細胞密度梯度離心采樣裝置、自動制片裝置、自動染色裝置和染色液處理裝置、高清晰 度CCD圖像采集器、高分辨率彩色數字自動顯微鏡平臺和顯微鏡、計算機控制系統及 控制軟件、LCD彩色顯示屏和彩色打印機；其中，所述尿細胞密度梯度離心采樣裝置由 尿細胞采集器、開關、橡皮塞、空氣金屬導管、自動控制流量和控制塞組成，所述尿細 胞密度梯度離心采樣裝置內裝有不同濃度的Ficoll液；所述自動制片裝置由底座、支架、 一次性塑料細胞甩片器、甩片器固定裝置、圓形橡皮圈、載玻片螺旋固定器、載玻片、 廢液箱、開關、高密度Ficoll尿細胞混合液、廢液流出管道和載玻片細胞孔組成；所述 自動染色裝置由進氣裝置、空氣槽、染液槽、載玻片轉盤、控制面板、電機、水漕、微 量染劑移液器、排風裝置、過濾裝置、輸液管和清水槽組成；所述自動染色裝置在玻片 染色控制軟件控制下進行染片；所述玻片染色控制軟件由全局時間軸構成，并引入基于 遺傳算法的概率搜索模塊；所述全局時間軸采用以單個染色動作為最小處理結點的鏈表 結構，邏輯上標記每個時刻系統的染色行為，并由一組函數提供插入、查詢操作的接口； 所述遺傳算法是在全局時間軸的基礎上，構建的恰當的調度順序。

2.權利要求1所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是所述尿樣本細胞分離裝置由濾 網灌注器、濾網和濾網支撐點構成；其中的濾網為30～300目。

3.權利要求1或2所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是以所述尿細胞微量染色分 析裝置進行的尿細胞微量染色分析包括下述步驟：

1）待測尿樣本分離后進行尿細胞采樣，

待測尿樣本進入尿細胞梯度密度離心采樣裝置，通過尿樣本細胞分離裝置自動分離后， 轉入尿細胞密度梯度離心采樣裝置，經密度梯度離心采集尿細胞液；

2）尿細胞自動薄層制片，

采集的尿細胞液經稀釋后，移至自動制片裝置內自動甩片制片；

3）尿細胞片自動微量染色，

制得的尿細胞片移入自動染色裝置在玻片染色控制軟件控制下進行染片；

4）采集尿細胞染片圖像

尿細胞染片置入高分辨率彩色數字自動顯微鏡平臺，經自動顯微平臺控制軟件控制，經 顯微鏡、視頻高清晰度CCD圖像采集器傳送至LCD彩色顯示屏上的圖像，

5）尿細胞分類標記和圖像拍照，定性、定量分析，

步驟4）的尿細胞染片圖像經尿細胞圖像實時采集自動分析定量處理軟件選定染色細胞 區域后進行尿細胞分類標記和圖像拍照，自動進行定性、定量分析；

6）打印尿液檢驗結果圖文報告，資料分類管理。

4.根據權利要求3所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是，所述的步驟1）經密度 梯度離心采集尿細胞液采用1.025～1.095g/ml的Ficoll密度梯度溶液為尿細胞采集液。

5.根據權利要求3所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是，所述的步驟2）的自動 甩片制片中采用1.010～1.050g/ml的Ficoll溶液懸浮提取尿細胞層。

6.根據權利要求3所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是，所述步驟3）的玻片染 色的染液為10～300μl的染色上樣量。

7.根據權利要求3所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是步驟3）所述的自動染色 裝置中的圓形載物臺與載玻片相耦合，圓形載物臺同時放置24～364片載玻片，采用旋 轉方式進行加樣設計，同時控制染色加樣的種類為24～64種，加樣時間為0.1～1秒， 染色時間為2秒～48小時。

8.根據權利要求3所述的尿細胞微量染色分析裝置，其特征是所述步驟5）的定量分析 過程是：尿細胞樣本通過濾網分離裝置、梯度密度離心提取細胞裝置、薄層甩片裝置、 染色圓形面積有標尺校正、確定靶細胞后計算機自動完成靶細胞的計數定量，所述的染 色圓形面積直徑為0.25～1.0mm。