[發明專利]利用組織培養生產大豆異黃酮的方法

無效

• 申請號: 200810040456.5
• 申請日: 2008-07-10
• 公開（公告）號: CN101318947A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發明（設計）人: 曹越平;陳冰;周斐紅;朱筠
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07D311/36
• 分類號: C07D311/36;A01H4/00
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 王錫麟;王桂忠

1、一種利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步，大豆無菌苗的獲得：取成熟的大豆種子，用滅菌劑進行滅菌，然后將大豆種子接種到萌發培養基上，經過培養得到大豆無菌苗，其中：萌發培養基為MS固體培養基，B5固體培養基，或MS固體培養基的無機成分加上B5固體培養基的有機成分；

第二步，外植體誘導愈傷組織：切取在第一步中得到的大豆無菌苗的組織，包括下胚軸、子葉節、子葉、真葉及根等部位，接種到愈傷組織誘導培養基中，每30天繼代培養1次，連續繼代培養3次；

第三步，大豆異黃酮的提?。河靡掖紡牡诙街械玫降挠鷤M織中提取大豆異黃酮。

2、根據權利要求1所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第一步中所述的滅菌劑是指氯氣或者過飽和漂白粉精片溶液。

3、根據權利要求1所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第一步中所述的大豆種子在萌發培養基上的培養溫度為24℃到26℃。

4、根據權利要求1所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第二步中所述的愈傷組織誘導培養基為：MS固體培養基的無機成分，加上B5固體培養基的有機成分，同時在該混合固體培養基中添加濃度為0.1mg/L的6-芐氨基腺嘌呤與濃度為1.0mg/L的2，4二氯苯氧乙酸，余量為瓊脂和滅菌水。

5、根據權利要求1所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第二步中所述的愈傷組織誘導培養基為：MS固體培養基，同時在該固體培養基中添加濃度為0.1mg/L的6-芐氨基腺嘌呤與濃度為1.0mg/L的2，4二氯苯氧乙酸，余量為瓊脂和滅菌水。

6、根據權利要求1所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第二步中所述的愈傷組織誘導培養基為：B5固體培養基，同時在該固體培養基中添加濃度為0.1mg/L的6-芐氨基腺嘌呤與濃度為1.0mg/L的2，4二氯苯氧乙酸，余量為瓊脂和滅菌水。

7、根據權利要求1所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第三步中所述的用乙醇從愈傷組織中提取大豆異黃酮的方法是指：將愈傷組織打碎，用乙醇提取，以0.5g樣品中使用5ml乙醇的配比進行提取。

8、根據權利要求7所述的利用組織培養生產大豆異黃酮的方法，其特征是，第三步中所述的乙醇，是指體積濃度為70％-80％的乙醇溶液。