[發(fā)明專利]一種真姬菇交配型基因的鑒別方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810039088.2
• 申請(qǐng)日: 2008-06-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101608213A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-12-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮志勇;劉明廣;高君輝;陳明杰;陳輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12Q1/04;A01H1/02
• 代理公司: 上海世貿(mào)專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 李浩東

1、一種真姬菇交配型基因的鑒別方法，其特征在于：a、從不同真姬菇菌株分離得到擔(dān)孢子單核菌株，選一真姬菇孢子單核菌株作為出發(fā)測(cè)試菌株，編號(hào)為T1，與所有擔(dān)孢子單核菌株進(jìn)行配對(duì)；b、若與T1配對(duì)親和，且出現(xiàn)鎖狀聯(lián)合，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因的A、B因子都不同；若與T1配對(duì)不親和，且出現(xiàn)平貼反應(yīng)，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因的A因子相同B因子不同；若與T1配對(duì)不親和，且出現(xiàn)柵欄反應(yīng)，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因A因子不同B因子相同；若與T1配對(duì)無(wú)上述三種現(xiàn)象，則該擔(dān)孢子單核菌株交配型基因與T1菌株A、B因子都相同。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種真姬菇交配型基因的鑒別方法，其特征在于：a步驟中，真姬菇菌株分離得到擔(dān)孢子單核菌株包括如下步驟：a)、選成熟開(kāi)傘真姬菇的子實(shí)體，剪去菌柄，菌褶一面平貼在平板上，置于25℃培養(yǎng)箱收集孢子；b)、用接種環(huán)蘸取少量擔(dān)孢子，于無(wú)菌水中制備孢子懸浮液，稀釋至400倍顯微鏡下每個(gè)視野有8-12個(gè)孢子；c)、取70μl懸浮液涂平板，25℃暗培養(yǎng)7天，在顯微鏡下用接種針挑取已萌發(fā)的孢子連同一小塊培養(yǎng)基，并轉(zhuǎn)接到平板上，再培養(yǎng)5天后鏡檢，確定無(wú)鎖狀聯(lián)合后保存?zhèn)溆茫籨)將兩配對(duì)供試單核菌株接種于木屑浸汁培養(yǎng)基上對(duì)峙培養(yǎng)7～10天，溫度保持在25℃，沿與反應(yīng)區(qū)相垂直的方向穿過(guò)兩菌落切取長(zhǎng)3cm寬0.5cm的菌塊，轉(zhuǎn)移至馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，在25℃的溫度下繼續(xù)培養(yǎng)5～10天。

3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種真姬菇交配型基因的鑒別方法，其特征在于：根據(jù)b步驟所得出的鑒別結(jié)果選擇親和的擔(dān)孢子單核菌株配對(duì)雜交，對(duì)雜交菌株菌絲體生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)勢(shì)及其農(nóng)藝性狀進(jìn)行測(cè)定，最后進(jìn)行雜交菌株的篩選。

4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種真姬菇交配型基因的鑒別方法，其特征在于：d步驟中，木屑浸汁培養(yǎng)基是在200g木屑浸汁中，加入瓊脂20g，再加蒸餾水至1000ml制得的。