[發(fā)明專利]一種真姬菇交配型基因的鑒別方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810039088.2
• 申請日: 2008-06-17
• 公開（公告）號: CN101608213A
• 公開（公告）日: 2009-12-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馮志勇;劉明廣;高君輝;陳明杰;陳輝
• 申請（專利權(quán)）人: 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;A01H1/02
• 代理公司: 上海世貿(mào)專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 李浩東

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及生物基因的技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是根據(jù)真姬菇擔(dān)孢子單核體交配型基因的鑒別方法，可提高真姬菇單-單雜交育種中主動性和有效性。

背景技術(shù)：

真姬菇[Hypsizygus?marmoreus(Peck)Bigelow]，又名蟹味菇、海鮮菇、鴻喜菇、玉蕈、膠玉蘑，隸屬于擔(dān)子菌亞門、層菌綱、傘菌目、白蘑科、離褶菌族、玉蕈屬，是一種質(zhì)地脆嫩，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，具有多種保健功效的珍稀食用菌，深受廣大消費(fèi)者的喜愛。

目前，我國與日本、韓國的一些大型食用菌企業(yè)已經(jīng)能夠通過控制溫度、濕度、光照和空氣成分進(jìn)行工廠化栽培真姬菇，并且取得了良好的經(jīng)濟(jì)效益，但是進(jìn)行工廠化生產(chǎn)用的菌種易退化，且已出現(xiàn)老化現(xiàn)象，給工廠化生產(chǎn)帶來了不穩(wěn)定因素。因此通過雜交育種，選育出既穩(wěn)定高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)又適合工廠化栽培的菌株是真姬菇工廠化生產(chǎn)亟待解決的問題。而在已開展的雜交育種過程中，效率一般較低，效果也不理想。其主要原因是真姬菇是標(biāo)準(zhǔn)四極性異宗結(jié)合的高等擔(dān)子菌，其交配系統(tǒng)受A和B兩對交配型基因的控制。交配型基因的多型性和對育性是其遺傳研究和菌種改良的基礎(chǔ)。而有關(guān)真姬菇交配型基因的鑒別方法國內(nèi)尚未見報道。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于提供一種改進(jìn)的真姬菇交配型基因的鑒別方法，該方法可穩(wěn)定準(zhǔn)確快速的從真姬菇孢子群體中得到四種標(biāo)準(zhǔn)交配型的單核體，提高真姬菇單-單雜交育種過程中主動性和有效性。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種真姬菇交配型基因的鑒別方法，其特征在于：a、從不同真姬菇菌株分離得到擔(dān)孢子單核菌株，選一真姬菇孢子單核菌株作為出發(fā)測試菌株，編號為T1，與所有擔(dān)孢子單核菌株進(jìn)行配對；b、若與T1配對親和，且出現(xiàn)鎖狀聯(lián)合，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因的A、B因子都不同；若與T1配對不親和，且出現(xiàn)平貼反應(yīng)，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因的A因子相同B因子不同；若與T1配對不親和，且出現(xiàn)柵欄反應(yīng)，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因A因子不同B因子相同；若與T1配對無上述三種現(xiàn)象，則該擔(dān)孢子單核菌株交配型基因與T1菌株A、B因子都相同。

本發(fā)明是將從不同真姬菇菌株分離得到擔(dān)孢子單核菌株，對其進(jìn)行交配型基因鑒別。在鑒別過程中，特別是平貼反應(yīng)、柵欄反應(yīng)的應(yīng)用和移植的應(yīng)用，鑒別時間縮短5～10天，且可不借助其它儀器和設(shè)備，較直觀快速的初步鑒別真姬菇交配型基因。本發(fā)明中利用了雙核菌株生長速度快于單核菌株的性質(zhì)，運(yùn)用移植的方法將這一性質(zhì)放大，能在較短時間明顯的將四種交配情形加以區(qū)分。將此方法應(yīng)用于雜交育種中，可方便的鑒別出真姬菇親本和子代菌株的交配型基因，增強(qiáng)了雜交育種過程的目的性和有效性。采用本方法理論上可使菌株對比篩選數(shù)量減少75％，提高可結(jié)實(shí)性，尤其在多菌株多次雜交育種應(yīng)用中，更為方便高效。然后根據(jù)鑒別結(jié)果選擇親和的，出現(xiàn)鎖狀聯(lián)合的孢子單核菌株進(jìn)行配對雜交，再根據(jù)生長速度、生長勢及農(nóng)藝性狀指標(biāo)對雜交菌株進(jìn)行篩選，獲得穩(wěn)定高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)雜交菌株。

附圖說明：

圖1為本發(fā)明實(shí)施過程的工藝流程圖

圖2為本發(fā)明的鎖狀聯(lián)合過程示意圖

圖3為本發(fā)明的平貼反應(yīng)菌落照片

圖4為本發(fā)明的柵欄反應(yīng)菌落照片

圖5為本發(fā)明的兩個親和菌株的菌落照片

圖6為本發(fā)明的兩個交配型基因相同菌株菌落照片

具體實(shí)施方式：

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。

一種真姬菇交配型基因的鑒別方法，其與現(xiàn)有技術(shù)的區(qū)別在于：a、從不同真姬菇菌株分離得到擔(dān)孢子單核菌株，選一真姬菇孢子單核菌株作為出發(fā)測試菌株，編號為T1，與所有擔(dān)孢子單核菌株進(jìn)行配對；b、若與T1配對親和，且出現(xiàn)鎖狀聯(lián)合，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因的A、B因子都不同；若與T1配對不親和，且出現(xiàn)平貼反應(yīng)，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因的A因子相同B因子不同；若與T1配對不親和，且出現(xiàn)柵欄反應(yīng)，則該擔(dān)孢子單核菌株與T1菌株交配型基因A因子不同B因子相同；若與T1配對無上述三種現(xiàn)象，則該擔(dān)孢子單核菌株交配型基因與T1菌株A、B因子都相同。