[發(fā)明專(zhuān)利]高致病性豬藍(lán)耳病病毒RT－PCR快速檢測(cè)試劑盒無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200810032141.6 | 申請(qǐng)日： | 2008-08-25 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN101343670A | 公開(kāi)（公告）日： | 2009-01-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 何世成;范仲鑫;劉道新;談志祥;邱立新;魯杏華;唐小明;黃建龍 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 湖南省獸醫(yī)總站 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12Q1/70 | 分類(lèi)號(hào)： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暫無(wú)信息 | 代理人： | 暫無(wú)信息 |
| 地址： | 410007*** | 國(guó)省代碼： | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 致病性 豬藍(lán)耳病 病毒 rt pcr 快速 檢測(cè) 試劑盒 | ||
1.一對(duì)高致病性豬藍(lán)耳病病毒(高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒，high?pathogenic?porcinereproductive?and?respiratory?syndrome?virus，HP-PRRSV)特異性檢測(cè)引物Primer?P1/P2，其序列為：
Primer?P1：5’-CGTAGAACTGTGACAACAAC-3’
Primer?P2：5’-TGAGTATTTTGGGCGTGTGAT-3’
其中Primer?P1/P2引物對(duì)在高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸中特異性擴(kuò)增出252bp的產(chǎn)物。
2.利用權(quán)利要求1所述引物組成的高致病性豬藍(lán)耳病病毒快速檢測(cè)試劑盒，其特征為：采用RNA快速提取方法提取待檢組織樣品的RNA核酸，按如下RT-PCR反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序，用Primer?P1/P2引物對(duì)進(jìn)行高致病性豬藍(lán)耳病病毒的RT-PCR擴(kuò)增檢測(cè)。
RT-PCR體系：AMV/Tfl?5×Reaction?Buffer?2.5μL，25mM/L?MgSO41μL，10mM/L?dNTP?0.5μL，AMV?Rever?Transcriptase?2.5u，Tfl?DNA?Polymerase?2.5u，20uM/L?Primer?P1?1μL，20uM/LPrimer?P2?1μL，待檢RNA模板5μL，加水至總體積25μL。
RT-PCR擴(kuò)增程序：45℃逆轉(zhuǎn)錄45min；94℃預(yù)變性2min；94℃30s、52℃45s、68℃45s，35個(gè)循環(huán)；最后68℃延伸8min。4℃保存。
電泳檢測(cè)：取8μLPCR產(chǎn)物，混合1μL上樣緩沖液，1～1.5％的瓊脂糖凝膠電泳分析PCR產(chǎn)物，以DNA分子量Marker為參考。
結(jié)果判斷：在陰性對(duì)照無(wú)條帶、陽(yáng)性對(duì)照有明顯252bp條帶的前提下，樣品出現(xiàn)252bp大小條帶定為高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸陽(yáng)性，否則判為陰性。
該專(zhuān)利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專(zhuān)利權(quán)人授權(quán)。該專(zhuān)利全部權(quán)利屬于湖南省獸醫(yī)總站，未經(jīng)湖南省獸醫(yī)總站許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買(mǎi)此專(zhuān)利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200810032141.6/1.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來(lái)源鉆瓜專(zhuān)利網(wǎng)。
- 一種非致病性遲緩愛(ài)德華氏菌的應(yīng)用
- 致病性構(gòu)象異構(gòu)體的分析
- 禽致病性大腸桿菌滅活疫苗及其制備方法
- 同時(shí)檢測(cè)10種致病性弧菌的試劑盒及檢測(cè)方法
- 一株禽致病性大腸桿菌菌株及其在疫苗制備中的應(yīng)用
- 一種鑒定哈維氏弧菌是否具有致病性的方法
- 致病性變異位點(diǎn)判定方法、裝置、計(jì)算機(jī)設(shè)備及存儲(chǔ)介質(zhì)
- 強(qiáng)致病性和非強(qiáng)致病性美人魚(yú)發(fā)光桿菌美人魚(yú)亞種的快速鑒定PCR反應(yīng)體系
- 一種高通量測(cè)序變異風(fēng)險(xiǎn)分組篩選方法
- 一種馬鈴薯黃萎病病原菌致病性測(cè)定方法
- 抗豬藍(lán)耳病卵黃抗體飼料添加劑和注射劑及其制備方法
- 一種抗豬藍(lán)耳病的轉(zhuǎn)移因子
- 一種疫苗組合物及其制備方法和應(yīng)用
- 檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病與經(jīng)典豬藍(lán)耳病的RT-PCR引物及試劑盒
- 檢測(cè)豬藍(lán)耳病流行病毒與HP-PRRS病毒天津株的RT-PCR引物及試劑盒
- 豬瘟病毒抗體、豬藍(lán)耳病病毒抗體和豬偽狂犬病病毒抗體的ELISA檢測(cè)試劑盒
- 一種保持藍(lán)耳病整體抗體水平的中藥組合物及引種方法
- 檢測(cè)新變異型高致病性豬藍(lán)耳病病毒的熒光RT-PCR引物、探針和試劑盒及檢測(cè)方法
- 一種用于同時(shí)擴(kuò)增北美型和歐洲型豬藍(lán)耳病病毒的二重RT-PCR引物、試劑盒和方法
- 豬miR-27b-3p作為豬藍(lán)耳病病毒抑制物的應(yīng)用
