[發(fā)明專利]變異鱗毛蕨的孢子繁殖方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810029109.2
• 申請(qǐng)日: 2008-06-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101297635A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-11-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王瑞江;唐源江;董仕勇;歐陽(yáng)嬋娟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院華南植物園
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 廣州科粵專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 潘偉健

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蕨類植物的孢子繁殖方法，具體地說(shuō)是涉及一種能快速繁殖變異鱗毛蕨(Dryopteris?varia(L.)Ktunze)的孢子繁殖方法。

背景技術(shù)

變異鱗毛蕨為中型草本植物，在我國(guó)熱帶及亞熱帶地區(qū)有廣泛分布，其林下土生，通常高40～80cm，株形美觀，葉色暗綠，四季常青，不但可開(kāi)發(fā)成為具有觀賞價(jià)值的觀葉植物，而且其根莖有清熱止痛的藥效，可以入藥，因此這種蕨類植物具有良好的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)價(jià)值。但是目前關(guān)于繁殖變異鱗毛蕨的研究極少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于開(kāi)發(fā)出一種能快速繁殖變異鱗毛蕨的方法。

我們通過(guò)將消毒過(guò)的變異鱗毛蕨孢子在孢子萌發(fā)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)得到片狀原葉體，然后將原葉體依次在增殖培養(yǎng)基、孢子體誘導(dǎo)培養(yǎng)基、孢子體繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，待長(zhǎng)出孢子葉后轉(zhuǎn)入孢子體生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待基部長(zhǎng)出細(xì)根就可以出瓶移植，全過(guò)程只需半年左右，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。

本發(fā)明的變異鱗毛蕨的孢子繁殖方法，其特征包括以下的步驟：

(1)收集變異鱗毛蕨孢子，先在酒精中浸泡25～30s，然后再在升汞溶液中浸泡7～8min，消毒后用無(wú)菌水漂洗；

(2)將上述消毒過(guò)的變異鱗毛蕨孢子用無(wú)菌水配成懸浮液，加入孢子萌發(fā)培養(yǎng)基中，在溫度23～25℃，光照強(qiáng)度2000～2500lx，光照時(shí)間11～13h/d條件下培養(yǎng)，先萌發(fā)出綠色絲狀體，再發(fā)育成片狀原葉體，所述的孢子萌發(fā)培養(yǎng)基是每升含6～8g瓊脂，18～22g蔗糖，其余為MS或1/2MS，pH?5.7～5.8的培養(yǎng)基；

(3)將上述片狀原葉體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，在溫度23～25℃，光照強(qiáng)度2000～2500lx，光照時(shí)間11～13h/d條件下，培養(yǎng)25～35d后，轉(zhuǎn)入孢子體誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，在溫度23～25℃，光照強(qiáng)度2000～2500lx，光照時(shí)間11～13h/d條件下，培養(yǎng)至原葉體出芽后轉(zhuǎn)入孢子體繼代培養(yǎng)基，在溫度23～25℃，光照強(qiáng)度2000～2500lx，光照時(shí)間11～13h/d條件下，培養(yǎng)至形成幼孢子體，長(zhǎng)出2～3片幼孢子葉；所述的增殖培養(yǎng)基每升中含有6-芐基嘌呤0.15～0.25mg，萘乙酸0.15～0.25mg，瓊脂6～8g，蔗糖28～32g，其余為MS，pH?5.7～5.8；所述的孢子體誘導(dǎo)培養(yǎng)基每升中含有激動(dòng)素6-糠基氨基嘌呤或N6-呋喃甲基腺嘌呤0.4～0.6mg，萘乙酸0.15～0.25mg，瓊脂6～8g，蔗糖28～32g，其余為MS，pH?5.7～5.8；所述的孢子體繼代培養(yǎng)基每升中含有萘乙酸0.05～0.15mg，瓊脂6～8g，蔗糖28～32g，其余為MS，pH?5.7～5.8；

(4)將上述幼孢子體分株轉(zhuǎn)接到孢子體生根培養(yǎng)基上，在溫度23～25℃，光照強(qiáng)度2000～2500lx，光照時(shí)間11～13h/d條件下，培養(yǎng)至幼孢子體基部長(zhǎng)出褐色帶鱗片的細(xì)根時(shí)，可出瓶移栽，煉苗后移栽至pH值為6.3～6.4的土壤基質(zhì)培養(yǎng)，所述的孢子體生根培養(yǎng)基每升中含有萘乙酸0.25～0.35mg，活性碳4～6g，瓊脂6～8g，蔗糖28～32g，其余為1/2MS培養(yǎng)基，pH?5.7～5.8。

步驟(1)中采用的酒精和升汞是植物材料通用的消毒劑，一般使用濃度酒精為體積分?jǐn)?shù)75％，升汞為1g/L，最好消毒用無(wú)菌水漂洗5次。

步驟(2)所述的光照的光源可以是日光燈。

步驟(3)所述的片狀原葉體在轉(zhuǎn)入孢子體誘導(dǎo)培養(yǎng)基后35～45d形成出芽的原葉體，所述的原葉體在轉(zhuǎn)入孢子體繼代培養(yǎng)基15～25d形成幼孢子體，長(zhǎng)出2～3片幼孢子葉，所述的增殖培養(yǎng)基，孢子體誘導(dǎo)培養(yǎng)基和孢子體繼代培養(yǎng)基的光照的光源可以是日光燈。

步驟(4)所述的光照的光源可以是日光燈，所述的煉苗時(shí)間為3～4d，所述的土壤基質(zhì)可以由花卉土，菜園泥和素沙按體積比2∶1∶1混合得到，也可以由塘泥、碎木、腐殖土和細(xì)沙等混合得到。

步驟(2)、(3)中所述的MS為國(guó)際通用的培養(yǎng)基，其成分和配制方法參看文獻(xiàn)(譚文澄、戴策剛主編.觀賞植物組織培養(yǎng)技術(shù).北京：中國(guó)林業(yè)出版社，1991.)；步驟(2)、(4)中所述的1/2MS是將MS中的大量元素濃度減半，而其他成分濃度不變而形成的培養(yǎng)基。

本發(fā)明投入少，設(shè)備簡(jiǎn)單，并有效地縮短了變異鱗毛蕨孢子的繁殖周期，從孢子萌發(fā)到幼孢子體形成僅需110d左右，獲得大量種苗，幼孢子苗成活率可達(dá)90％，使變異鱗毛蕨成為優(yōu)良的觀葉植物并發(fā)揮其藥用價(jià)值。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明不限于以下實(shí)施例。

實(shí)施例1：