[發(fā)明專利]一種共表達人源谷氨酸脫羧酶和細胞因子的重組病毒

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810028196.X
• 申請日: 2008-05-21
• 公開（公告）號: CN101586096A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王尚武;朱雅南;徐評議
• 申請（專利權(quán)）人: 王尚武;朱雅南;徐評議
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/60;C12N15/12;C12N15/62;C12N15/10;A61K38/17;A61K48/00;A61P25/00;A61P25/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種共表達谷氨酸脫羧酶和細胞因子的重組病毒、尤其是 重組腺相關(guān)病毒的構(gòu)建及其制備方法，其所在的技術(shù)領(lǐng)域與生命科學(xué)和生 物醫(yī)藥技術(shù)有關(guān)。

背景技術(shù)

研究證明哺乳類腦紋狀體及紋狀體投射區(qū)域的大多數(shù)神經(jīng)元的神經(jīng) 遞質(zhì)為γ-氨基丁酸(GABA，下同)，GABA為哺乳類腦組織的主要抑制性神 經(jīng)遞質(zhì)，而谷氨酸脫羧酶(GAD，下同)是合成GABA限速酶，GAD有GAD?65 和GAD?67兩種同功酶(Lindefors?N.et?al：Prog.Neuropsycho.pharmacol.Biol?Psychiatry.1993；17(6)：887-903)。有研究人員應(yīng)用表達GAD65基 因的腺相關(guān)病毒(AAV，下同)對動物模型帕金森氏病進行治療性研究，結(jié) 果顯示帕金森氏癥狀有明顯改善，電生理研究也證明增加GAD65在下丘核 神經(jīng)元的表達，可使下丘核神經(jīng)元從興奮性輸出狀態(tài)改變?yōu)橐种菩暂敵鰻? 態(tài)(Lee?B，et?al：Gene?Ther.2005?Aug；12(15)：1215-22；Emborg?ME，et?al： J?Cereb?Blood?Flow?Metab.2007?Mar；27(3)：501-9.)，這些研究為GAD治療人帕金 森氏病打下了堅實的基礎(chǔ)。

新近報導(dǎo)，經(jīng)批準(zhǔn)，美國在12名晚期帕金森氏病患者應(yīng)用表達GAD65 基因的AAV對帕金森氏病進行了臨床I期研究，結(jié)果表明帕金森氏癥狀有 顯著改善，耐受良好、安全、有效(Kaplitt?MG，et?al：Lancet.2007?Jun 23；369(9579)：2056-8)。國內(nèi)研究人員應(yīng)用對人體無致病性的泡疹病毒作 為表達載體在星狀細胞進行表達GAD研究，但尚未在動物或人體對帕金森 氏病進行治療研究(Liu?W，et?al：Intervirology.2005 Sep-Oct；48(5)：329-35；Liu?W?et?al：Mol?Ther.2007)。

此外，已經(jīng)研究證明GABA合成酶GAD與驚厥、癲癇和小腦性共濟失 調(diào)癥的發(fā)生有關(guān)。缺失GAD65的小鼠發(fā)生自發(fā)性癲癇，回交產(chǎn)生的GAD65 缺失的小鼠癲癇發(fā)作易感性顯著增加(Kash?SF，et?al：Proc?Natl?Acad?SciUSA.1997?Dec?9；94(25)：14060-5))；而在癲癇動物模型腦相關(guān)部位移 植表達GABA合成酶GAD的細胞可減少或阻斷癲癇的發(fā)生(Gernert?M，et?al： Exp?Neurol.2002?Jul；176(1)：183-92；W，et?al：J?NeurosciRes.1998?Jan?15；51(2)：196-209；Vulliemoz?S，et?al：J?NeurolNeurosurg?Psychiatry)。

毫無疑問，上述臨床研究證實了GAD作為哺乳類腦神經(jīng)細胞的主要 抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA的合成限速酶用于治療帕金森氏病是安全、有效的。 不過，顯然，這種治療是一種改善帕金森氏病癥狀性的冶療，并不能改變 帕金森氏的病理進程以及由此產(chǎn)生的其他臨床癥狀。