[發明專利]一種地衣芽孢桿菌及其利用污泥為原料生產堿性蛋白酶的方法有效
| 申請號: | 200810026812.8 | 申請日: | 2008-03-14 |
| 公開(公告)號: | CN101245327A | 公開(公告)日: | 2008-08-20 |
| 發明(設計)人: | 周順桂;王躍強;雷發懋 | 申請(專利權)人: | 廣東省生態環境與土壤研究所 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12N9/56;C12R1/10 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利代理有限公司 | 代理人: | 陳衛 |
| 地址: | 510650廣東*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 地衣 芽孢 桿菌 及其 利用 污泥 原料 生產 堿性 蛋白酶 方法 | ||
1.一種地衣芽孢桿菌,為革蘭氏陽性菌,直桿狀,于2007年3月12日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,編號為:CGMCC?1970。
2.利用權利要求1所述地衣芽孢桿菌生產堿性蛋白酶的方法,其特征在于包括如下步驟:
(1)培養基調理:調節污泥含固率為2~5%,加入0.1~0.3%泡敵,用酸或堿調pH為7.0~7.5,攪拌均勻,滅菌,冷卻備用;
(2)搖瓶培養:挑取一環地衣芽孢桿菌接種到裝有LB液體培養基中,28~32℃、50~250轉/分搖瓶培養10~15小時;
(3)發酵罐發酵:按1~5%的接種量將搖瓶菌液移入裝有含固率為2~5%的污泥的發酵罐,進行發酵培養;
(4)蛋白酶純化:發酵完成后,調pH為6.0~7.0,濃縮制成液體劑型或凝聚、過濾制成堿性蛋白酶固體劑型。
3.如權利要求2所述的方法,其特征在于步驟(1)所述滅菌為在0.1KPa壓力與121℃下滅菌45分鐘。
4.如權利要求2所述的方法,其特征在于步驟(2)所述LB液體培養基配方為:酵母浸膏5g,胰蛋白胨10g,NaCl?5g,水1000mL,pH?7.2~7.6。
5.如權利要求2所述的方法,其特征在于步驟(3)所述發酵培養的條件為:罐溫28~32℃,發酵時間60~80小時。
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