[發明專利]一種用于腫瘤基因治療的重組單純皰疹病毒

有效

• 申請號: 200810025433.7
• 申請日: 2008-05-04
• 公開（公告）號: CN101338302A
• 公開（公告）日: 2009-01-07
• 發明（設計）人: 瞿伯榮
• 申請（專利權）人: 羅益（無錫）生物制藥有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N15/869;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

發明領域

本發明涉及一種采用重組單純皰疹病毒來治療腫瘤的基因治療方法。特別的，涉及一種定點缺失一包含ICP0，ICP4，和ICP34.5基因的重復區段(IR)的缺陷型重組I型單皰疹病毒，及其在治療腫瘤中的應用。本發明進一步涉及含有上述病毒的藥物組合物。

技術背景

腫瘤是影響人類健康甚至危及生命的常見病、多發病，對腫瘤的治療通常是采用手術、放療、化療或中藥治療方案，但對中晚期腫瘤的療效欠佳。

自1990年French?Anderson等把腺嘌呤脫氨酶(ADA)基因成功地治療了ADA缺陷病，開創了利用人基因治療疾病的先例，最初基因治療僅用于基因缺陷的遺傳性疾病(Anderson?et?al.，Science，1992)。隨著基因克隆技術的發展和基因治療的思路拓寬，人們又將人體基因應用于對腫瘤的治療。

隨著腫瘤分子生物學研究的深入，發現腫瘤發生的分子機制是極其復雜的，通常是因原癌基因的序列突變、移位、擴增和過度表達而導致異常激活，或/和由于抑癌基因的突變、缺失而導致基因失活所致，從而引起細胞的惡性增生和凋亡失控而致癌。但目前大部分腫瘤的基因治療仍處于初期階段，僅有少數進入II/III期臨床試驗。

腫瘤基因治療中存在的主要問題是：(1)腫瘤治療所選擇的治療性基因往往擺脫不了遺傳缺陷病的基因治療模式，治療基因單一，難于完全糾正腫瘤組織細胞中致瘤相關的多種基因異常，因此治療效果不太理想。(2)目前用于腫瘤基因治療的載體均不同程度存在一些缺陷：攜帶治療基因的質粒載體，雖然操作方便也很安全，但轉染效率低，治療基因不能獲得長期穩定和有效的表達，其療效受限；攜帶治療基因的病毒載體盡管可克服質粒載體的一些缺陷，但也不同程度存在薄弱環節，早期常用的病毒載體大多為復制缺陷型的腺病毒(AdV)和逆轉錄病毒(RV)。這類載體的最大的問題是在腫瘤內的擴散性很差。由于病毒的體積和表面所帶的電荷，使之在腫瘤實體內物理擴散的能力極差，如果不能在腫瘤中自行復制，則只能依靠“旁觀者效應”達到增加療效的作用。正因上述原因，目前腫瘤的基因治療的臨床療效仍沒有發生重大突破，大部分I期臨床試驗結果只顯示出較低的臨床療效，往往還需要借助聯合放療、化療、手術治療等臨床上常用的治療方案方能增效。

針對上述非復制型病毒的不足之處，近幾年來能夠在腫瘤內特異性地復制并造成腫瘤細胞裂解的融瘤型病毒已成為在基因的腫瘤治療方面的發展趨勢。融瘤型病毒的特點是利用病毒載體在腫瘤細胞中選擇性的發生條件性復制而裂解腫瘤細胞，病毒釋放后又可通過的生物擴散而不斷擴展融瘤功效。因此選擇性復制裂癌病毒載體的溶瘤作用在腫瘤治療中可能比攜帶治療基因的病毒表達載體顯得更加有效，具有更加良好的應用前景。病毒只有在敏感細胞中借助細胞的翻譯機器和能量才能大量復制，有些病毒經組裝后，可通過裂解的細胞而大量釋放，并產生明顯的細胞病理效應(CPE)。隨著病毒學和分子生物學的深入研究和發展，人們對腫瘤發生的分子機理和病毒復制及調控的分子機制有了更深入的了解，進而通過自然篩選(如呼腸病毒)和基因改造(如腺病毒、皰疹病毒)建立了用于殺死癌細胞的裂癌病毒，使之能選擇性地在腫瘤細胞中進行條件性復制，進而僅對腫瘤細胞發生特異裂解，但對正常細胞不引起傷害。

人I型單純皰疹病毒(HSV-1)屬于皰疹病毒科，單皰病毒屬，為一種雙鏈DNA病毒，常感染人的眼、口腔和面部皮膚粘膜，是一種腫瘤基因治療常用的融瘤型病毒載體。