[發明專利]一種用于腫瘤基因治療的重組單純皰疹病毒

有效

• 申請號: 200810025433.7
• 申請日: 2008-05-04
• 公開（公告）號: CN101338302A
• 公開（公告）日: 2009-01-07
• 發明（設計）人: 瞿伯榮
• 申請（專利權）人: 羅益（無錫）生物制藥有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N15/869;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種命名為HEPAWEL的重組單皰疹病毒，其特征在于其特異性缺失了野生型HSV-1病毒F株基因組的第117071至第131534堿基對的序列，從而使重組病毒中只包括一個拷貝的ICP0，ICP4，和ICP34.5基因。

2.一種構建重組單皰疹病毒的方法，其特征是，特異性缺失了野生型HSV-1病毒F株基因組中的內部重復區段，從而使重組病毒中只包括一個拷貝的ICP0，ICP4，和ICP34.5基因。

3.如權利要求2所述的構建重組單皰疹病毒的方法，其特征在于：

首先，將野生型HSV-1病毒F株基因組的第114517堿基對的SalI到第117071堿基對的EcorRI之間2554bp片段，及第131534堿基對的EcoRI到第133520堿基對的XhoI之間1986bp片段分別克隆到同一個pbluescriptKS的SstI和XhoI多克隆位點中構建成pKSdelIR質粒；

在質粒pKSdelIR的兩個HSV片段中間的NotI切點上插入GFP表達盒，構建成質粒pKSdelIRGFP；

將質粒pKSdelIRGFP與HSV-1病毒DNA，共轉染的Vero細胞上，挑選出表達GFP蛋白的綠色病毒蝕斑；

經3次純化得到重組病毒HepaGreen；再將質粒pKSdelIR與重組病毒HepaGreen的病毒DNA共轉染的Vero細胞；

從綠色病毒蝕斑挑選出無色病毒蝕斑，經純化和鑒定為缺失了IR的HEPAWEL。

4.一種以如權利要求1所述的重組單皰病毒為骨架的攜帶其他外源性基因的重組病毒，其中所述其他外源性基因包括能造成腫瘤細胞凋亡的基因，能抑制血管生成的基因，以及能刺激免疫活性的基因。

5.權利要求1所述的重組單皰疹病毒在制備用于治療腫瘤的藥物中的應用，所述腫瘤為胃癌、肺癌、慢性髓源性白血病或肝癌。

6.一種用于治療胃癌、肺癌、慢性髓源性白血病或肝癌的藥物，其特征在于所述藥物含有權利要求1所述的重組單皰疹病毒作為活性成分。

7.權利要求5所述的重組單皰疹病毒在制備用于治療腫瘤的藥物中的應用，其特征在于所述藥物在腫瘤治療中可以通過各種給藥途徑給藥。

8.權利要求7所述的重組單皰疹病毒在制備用于治療腫瘤的藥物中的應用，其特征在于所述給藥途徑為全身靜脈注射，局部腫瘤血管內給藥以及腫瘤內給藥。