[發(fā)明專利]負(fù)載重組人HSP70多肽復(fù)合物的樹突狀細(xì)胞疫苗、制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810021896.6
• 申請日: 2008-08-27
• 公開（公告）號: CN101461942A
• 公開（公告）日: 2009-06-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 時宏珍
• 申請（專利權(quán)）人: 時宏珍
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/385;A61K39/00;A61K39/04;A61K39/21;A61K39/29;A61P31/00;A61P35/00
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技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于生物制藥領(lǐng)域，更具體涉及到將抗原多肽與重組人熱休克蛋白70(rhHSP70)形成復(fù)合物，再將復(fù)合物負(fù)載于樹突狀細(xì)胞(DC)制備出樹突狀細(xì)胞多肽疫苗，用于腫瘤及感染性疾病的治療。

背景技術(shù)：

1.惡性腫瘤與感染性疾病發(fā)病及治療現(xiàn)狀

(1)腫瘤發(fā)病與治療進(jìn)展

腫瘤與傳染性疾病為全球公認(rèn)的嚴(yán)重威脅人類生命與健康的重大疾病。在第18屆國際抗癌癥聯(lián)盟大會上，世界衛(wèi)生組織發(fā)表的一項研究報告表明，全球癌癥狀況將日益嚴(yán)重，今后20年新患者人數(shù)將由目前的每年1000萬增加到1500萬，因癌癥而死亡的人數(shù)也將由每年600萬增至1000萬。我國流行病學(xué)調(diào)查表明，2003年我國城市居民惡性腫瘤致死率為94.71/10萬，癌癥成為第一位致死疾病；農(nóng)村居民惡性腫瘤患者病死率更高，為104.01/10萬，居全部死亡疾病之首。

腫瘤已成為人類的第一號“殺手”。現(xiàn)行治療腫瘤的常規(guī)方法(手術(shù)、放療與化療)雖在一定程度上緩解癥狀，但近80％的腫瘤患者在經(jīng)受手術(shù)、放療與化療的痛苦之后仍因腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移而死亡。因此，開發(fā)新型抗腫瘤方法與藥物必須而且緊迫。

現(xiàn)在認(rèn)為腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與宿主免疫狀態(tài)有著密切關(guān)系。因此，以通過提高腫瘤組織對宿主的免疫原性和增強(qiáng)機(jī)體對腫瘤細(xì)胞免疫應(yīng)答能力的方式來抑制或消除腫瘤的免疫治療是抗腫瘤治療的重要方法。以免疫治療為主體的腫瘤生物治療已被公認(rèn)為繼手術(shù)、放療和化療后腫瘤治療的“第四模式”，其療效已在多種腫瘤的治療中得到驗證。基于機(jī)體細(xì)胞免疫機(jī)制的抗腫瘤細(xì)胞免疫治療與治療性疫苗的研發(fā)(如DC疫苗)已成為研究與開發(fā)熱點。

(2)重大傳染病發(fā)病與治療現(xiàn)狀

近年來隨著預(yù)防性疫苗的使用與普及，常見多發(fā)傳染病得到有效控制，發(fā)病率大幅度下降，但部分重大傳染性疾病的危害仍很嚴(yán)重。

結(jié)核病(Tuberculosis，TB)一直是人們關(guān)注的一個全球性健康問題，盡管大多數(shù)人(約90％)在感染結(jié)核桿菌(MTB)后體內(nèi)啟動了保護(hù)性的有效的細(xì)胞免疫反應(yīng)來阻止其發(fā)展成為活動性結(jié)核病，但伴隨近年來耐藥結(jié)核桿菌的流行，以及結(jié)核桿菌與人類免疫缺陷病毒(Human?Immunodeficiency?Virus，HIVs)的雙重感染，導(dǎo)致TB的發(fā)病率與死亡率大幅度上升，TB已成為傳染病中的頭號殺手。

WHO最新統(tǒng)計表明全球人口的1/3(約20億)感染過MTB，每年超過200萬人死于結(jié)核病。我國每年新發(fā)生的耐藥結(jié)核病患者數(shù)約占全世界的1/4，2002年報告新發(fā)肺結(jié)核患者58多萬例，80％在農(nóng)村。由于經(jīng)濟(jì)和管理等方面原因，導(dǎo)致治療不徹底或服藥不規(guī)律，造成耐藥結(jié)核病患者逐年增多。卡介苗(Bacillus?CalmetteGuerin，BCG)是目前唯一獲準(zhǔn)用于預(yù)防結(jié)核病的疫苗，主要用于預(yù)防兒童結(jié)核的發(fā)病，對成人結(jié)核發(fā)病預(yù)防作用從0-80％不等。鑒于BCG自身的不足(BCG變異、BCG制備過程中丟失部分與免疫記憶及保護(hù)性相關(guān)蛋白等)以及耐藥MTB的流行，研制新型疫苗是控制結(jié)核病的重要途徑。

乙型肝炎病毒(HBV)感染則是又一種全球重大的公共衛(wèi)生問題。預(yù)計全世界有3億慢性HBV攜帶者，我國約占1.3億。其中50-75％為有活動性病毒復(fù)制的慢性HBV攜帶者，他們中30％可能發(fā)展為肝硬化，5-10％可能發(fā)展為肝細(xì)胞癌。估計全球每年死于與HBV感染有關(guān)的慢性肝病人數(shù)約100萬人。

盡管a-干擾素與拉米夫定等新藥使得慢性乙型肝炎的治療得到改善，但由于HBV在肝內(nèi)復(fù)制過程的復(fù)雜性，對復(fù)制過程中形成的cccDNA至今尚未找到有效的抗病毒藥加以清除。大量研究表明：慢性HBV感染者免疫應(yīng)答水平低下或缺失，病毒特異性T細(xì)胞數(shù)量和功能都降低，HBV特異性的CTL和Th細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)微弱，甚至檢測不到針對HBV的特異性CTL反應(yīng)，這種免疫耐受狀態(tài)是導(dǎo)致HBV慢性持續(xù)感染的根源。因此，打破免疫耐受，重建慢性HBV感染病人特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答可能是慢性HBV感染得到根治的最新方法。

2.特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)在抗腫瘤、抗感染性疾病中的重要作用

(1)人體免疫系統(tǒng)的作用機(jī)制

人體免疫系統(tǒng)的主要功能之一是識別并清除異已(抗原)，如體內(nèi)變異細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)，感染病原體的宿主細(xì)胞(如感染HBV的肝細(xì)胞等)，及外來入侵的細(xì)菌(如TB)、病毒與寄生蟲等。