[發(fā)明專利]大球蓋菇菌種保藏方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810017694.4
• 申請(qǐng)日: 2008-03-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101240241A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫智敏;季彬;曾楊;魏甲乾;祁宏山;張軍;趙小鋒;王治業(yè);周劍平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 甘肅省科學(xué)院生物研究所
• 主分類號(hào): C12N1/04
• 分類號(hào): C12N1/04;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 甘肅省知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)中心
• 代理人: 張克勤

1.一種大球蓋菇菌種保藏方法，其特征在于：它包括下列步驟，

a)、配置引導(dǎo)馴化平板培養(yǎng)基：培養(yǎng)基組成配方為小麥提取液20g、酵母提取液1g、蔗糖0.75g、乳糖1g、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂1g、氯化鈉0.3g、檸檬酸鐵0.2g、瓊脂1.2g和蒸餾水92.55g，pH6.8，制成無(wú)菌平皿，待培養(yǎng)基凝固時(shí)，在培養(yǎng)基表面鋪設(shè)一層多孔紙；

b)、耐凍、耐負(fù)壓的菌絲體制備：待培養(yǎng)基冷卻至20～25℃時(shí)，將大球蓋菇菌種接種至載體上，在25℃無(wú)菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)144小時(shí)，然后在無(wú)菌條件下將載體連同菌種一并取下，并按照安瓿管底部大小剪切至相應(yīng)大小放置于安瓿管底部，加入保護(hù)劑0.1～0.2mL，保護(hù)劑配方為脫脂牛奶18g、葡萄糖1g、甘露醇2g、纖維素1g和蒸餾水100ml；

c)、菌絲體真空冷凍干燥：將安瓿管放入冷凍干燥機(jī)，降溫速度為每分鐘2℃，冷卻至-40℃，恒溫預(yù)凍1.5小時(shí)，然后開(kāi)啟真空泵，在15分鐘內(nèi)真空度達(dá)到22.5帕后，以每30分鐘隔板溫度升高5℃，真空度降低5帕，待隔板溫度升高至24℃，真空度降到0.8～1.3帕，樣品溫度升高至24℃時(shí)，真空冷凍干燥完成。