[發明專利]一種簡易檢測蛋雞禽流感和新城疫免疫抗體的方法

無效

• 申請號: 200810015253.0
• 申請日: 2008-04-14
• 公開（公告）號: CN101320043A
• 公開（公告）日: 2008-12-10
• 發明（設計）人: 秦鳳云
• 申請（專利權）人: 秦鳳云
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 泰安市泰昌專利事務所
• 代理人: 高軍寶

1、一種簡易檢測檢測蛋雞禽流感免疫抗體的方法，其包括如下步驟： 禽流感血凝抑制試驗：

步驟1，把已編好號的雞蛋用消毒劑洗凈，再用清水漂洗干凈，擦干備用；

步驟2，在微量反應板的第1孔、第12孔加入0.05mlPBS液、2-11孔均加入0.025mlPBS 液；

步驟3，把雞蛋磕開，瀝出蛋清，只留蛋黃在半邊蛋殼中，用5ml注射器吸取蛋黃0.2- 0.5ml，滴0.05ml于微量反應板第1孔內，如此反復，把其他雞蛋樣品加入微量反應板每 排的第1孔內；

步驟4，把微量反應板放在快速混勻器上振蕩2-5分鐘，使蛋黃與PBS液充分混合后，吸 取0.05ml用做新城疫抗體檢測，再吸取0.025ml加入第2孔，用微量移液器反復吹吸混 勻吸取0.025ml加入第3孔，依次對倍稀釋至第10孔吸取0.025ml棄之；

步驟5，1-11孔均加入含4單位抗原的H5亞型抗原液0.025ml，放在微量振蕩器上振蕩 混勻，置20℃-25℃室溫下靜置30分鐘；

步驟6，每孔加入0.025ml的1％的雞紅細胞懸液，放在微量振蕩器上振蕩混勻，靜置40 分鐘；

步驟7，結果判定：

以完全抑制4個單位抗原的最高稀釋倍數作為HI滴度，判定結果時為避免卵黃的影

響，可在微量反應板反面觀察凝聚圖形，HI價大于或等于5Log2判定免疫良好； 新城疫血凝抑制試驗：

在微量反應板的2-11孔均加入0.025mlPBS液，第12孔加入0.05mlPBS液，把上述 步驟4中第1孔中吸取的0.05ml蛋黃與PBS混合液取0.025ml加入第1孔，另0.025ml 加入第2孔使之與PBS液充分混合后，吸取0.025ml加入第3孔，依次對倍稀釋至第11 孔吸取0.025ml棄之，其他依照上述禽流感血凝抑制試驗進行，只是將步驟5中H5亞型 抗原液換成新城疫抗原液。