[發(fā)明專利]擬康氏木霉胞外多糖及其制備方法和應(yīng)用無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200810014047.8 | 申請(qǐng)日: | 2008-01-23 |
| 公開(公告)號(hào): | CN101220101A | 公開(公告)日: | 2008-07-16 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 張鵬英;陳靠山;郝林華;魏廣金 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 山東大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C08B37/00 | 分類號(hào): | C08B37/00;C12P19/04;A61K31/715;A61P35/00;C12R1/885 |
| 代理公司: | 濟(jì)南金迪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人: | 許德山 |
| 地址: | 250100山東*** | 國(guó)省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 擬康氏木霉胞外 多糖 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種擬康氏木霉胞外多糖,其特征在于,
(1)通過高效凝膠過濾層析檢測(cè),其具有單一對(duì)稱峰,分子量為18325;
(2)通過改良的硫酸-苯酚法和間苯基苯酚法檢測(cè),其中性多糖含量為65.2%,糖醛酸含量為32.6%;
(3)通過糖醇乙酸酯的氣相色譜(GC)分析,其單糖組成為鼠李糖、葡萄糖和半乳糖,摩爾比為Rha∶Glc∶Gal=5.6∶2.7∶1.0。
2.一種擬康氏木霉胞外多糖,其特征在于,該多糖完全還原后,鼠李糖、葡萄糖和半乳糖的摩爾比為Rha∶Glc∶Gal=14.5∶9.3∶1.0,并且其含有摩爾含量為26.6%的葡萄糖醛酸。
3.一種擬康氏木霉胞外多糖,其特征在于,它是將擬康氏木霉發(fā)酵液脫色、濃縮、醇沉和去蛋白后,通過凝膠層析柱純化得到的均一多糖。
4.權(quán)利要求1-3任一所述擬康氏木霉胞外多糖的制備方法,包括步驟(1)粗多糖的制備和步驟(2)多糖的純化,其特征在于,
所述步驟(1)粗多糖的制備,包括:
A、將擬康氏木霉接入液體培養(yǎng)基后,28℃、130轉(zhuǎn)每分鐘振蕩培養(yǎng)6天;
B、過濾離心除去菌絲和孢子,過3520樹脂柱脫色,收集洗脫液,減壓濃縮至原體積的1/4;
C、濃縮液用Sevag法脫蛋白;
D、加入乙醇于4℃靜置過夜,離心收集沉淀,用乙醚、丙酮、95%乙醇依次洗滌,沉淀溶于蒸餾水,透析48h后濃縮到原體積1/4,經(jīng)冷凍干燥得胞外粗多糖樣品,
所述步驟(2)多糖的純化,包括:
A、采用葡聚糖凝膠G-75葡聚糖凝膠柱層析法,稱取木霉胞外粗多糖1g,溶于10ml的水中,上柱,室溫下用水進(jìn)行洗脫,控制流速0.4ml/min;
B、用分部自動(dòng)接收器每15分鐘一管,苯酚-硫酸顯色法逐管跟蹤檢測(cè),于490nm處測(cè)定光吸收值;
C、根據(jù)洗脫體積對(duì)吸光值作圖,合并單一高峰區(qū)的多糖溶液,減壓濃縮,冷凍干燥,得到擬康氏木霉胞外多糖初步純化組分,
將前述所得初步純化組分Sephadex?G-100葡聚糖凝膠層析純化,得目的產(chǎn)物。
5.權(quán)利要求1-3任一所述擬康氏木霉胞外多糖在制備提高哺乳動(dòng)物免疫活性藥物或功能性食品中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1-3任一所述擬康氏木霉胞外多糖在制備治療或輔助治療腫瘤的藥物以及功能性食品中的應(yīng)用。
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