[發明專利]一種海蜇膠原蛋白的提取及其制備膠原肽的方法

無效

• 申請號: 200810013761.5
• 申請日: 2008-01-10
• 公開（公告）號: CN101245095A
• 公開（公告）日: 2008-08-20
• 發明（設計）人: 李八方;莊永亮;趙雪
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明涉及一種酸堿處理，熱水抽提制備海蜇膠原蛋白的方法及利用酶工程技術獲取不同分子量段的活性肽的方法。本發明充分利用了海蜇資源，對海蜇的儲存和高值化利用提出新思路。本發明制備膠原蛋白及多肽的提取率高，生產周期短，生產工藝簡單，成本低廉。產品呈白色或淡黃色，質量好，極易溶于水，可用于醫療保健、化妝和食品等領域。

背景技術：

海蜇不僅種類多、數量大，而且分布廣，遍及世界各海區，是海洋浮游動物群落的重要組成部分，在海洋生物生態系統中占有重要地位。海蜇作為一種醫食同源的大型生物，在我國有著廣泛的資源分布，從遼寧大連一直到廈門、臺灣基隆都有分布，我國是世界上第一個食用和利用海蜇資源的國家。

隨著捕撈和養殖技術日趨完善，海蜇年產量日益增高。海蜇的加工與高值化利用逐漸引起人們的注意。國內外研究發現海蜇傘部中膠原蛋白含量較高，膠原蛋白中含有豐富的甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸，其水解產物中含有大量生理活性肽。這些特性使海蜇膠原蛋白及其水解產物在醫療、保健及美容方面具有良好的應用前景。

膠原蛋白及其多肽目前用途非常廣泛，遍及醫藥、化工、食品等領域，產品有各種不同形狀，大小及用途，并依其形狀、大小配合各項用途，其中生物材料、保健品與化妝品的應用是熱門研究的課題。

目前對海蜇膠原蛋白的提取方法集中在蛋白酶低溫水解，酸性條件下抽提。此法提取膠原蛋白的提取率和純度較高，但操作繁瑣、生產周期長，要求條件高，成本昂貴，不宜工業化生產。

至今尚未見到用酸堿溶脹，熱水提取海蜇膠原蛋白及利用酶工程技術獲取不同分子量段的活性肽的報道。海蜇膠原蛋白及其多肽的制備方法是：(1)使用新鮮海蜇、解凍海蜇或鹽漬海蜇；(2)采用酸堿對原料進行預處理；(3)熱水提取膠原蛋白；(4)對膠原蛋白進行定向酶解；(5)超濾分離濃縮，得到分子量不同的梯級膠原肽。

發明內容：

本發明目的：提供一種用酸堿處理，熱水抽提海蜇膠原蛋白及其制備膠原梯級肽的方法，它能克服現有技術的上述缺陷，并提供一個儲存和精加工海蜇的方法。

一種酸堿處理，熱水抽提海蜇膠原蛋白及其制備膠原梯級肽的方法，其特征是將新鮮海蜇、解凍海蜇或鹽漬海蜇用自來水清洗，機械斬切成碎片。將一定量預處理的海蜇加入0.5-8倍體積0.2％-1％NaOH浸泡0.5-24h，用水清洗至中性，加入0.5-8倍體積0.2％-1％?H₂SO₄浸泡0.5-24h，用水清洗后勻漿；勻漿液在酸性條件下加熱到60-90℃，并在此溫度下不斷攪拌抽提6-8h，離心過濾；殘渣加入1-4倍體積的水，于60-90℃抽提2-4小時，離心過濾，合并兩次提取液。一方面提取液脫鹽濃縮干燥，得到膠原蛋白制品；另一方面將提取液調制成1％-5％(w/v)的濃度，根據分子量和生物活性的要求，采用堿性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和風味蛋白酶在最適條件下進行單酶或復合酶水解。水解液利用超濾技術分別收集不同分子量段的濾液，噴霧干燥獲得梯級活性肽制品。

具體實施方式：

具體實施方式1：將新鮮海蜇用水沖洗干凈，去除粘著的泥沙雜質和因海蜇自溶所形成的黏液，并摘除內臟。用自來水清洗，機械斬切成碎片將一定量預處理的海蜇加入1倍體積1％NaOH浸泡12h，用水清洗至中性，加入1倍體積1％H₂SO₄浸泡6h，用水清洗后勻漿；調節勻漿液pH至5.0加熱到70℃，并在此溫度下不斷攪拌抽提8h，離心過濾；殘渣加入2倍體積的水，于80℃抽提3小時，離心過濾；合并兩次提取液。提取液經脫鹽濃縮干燥，得到膠原制品。

具體實施方式2：將冷凍的海蜇樣品解凍，用自來水清洗，機械斬切成碎片。將一定量預處理的海蜇加入2倍體積1％NaOH浸泡6h，用水清洗至中性，加入2倍體積1％H₂SO₄浸泡3h，用水清洗后勻漿；勻漿液在酸性條件下加熱到70℃，并在此溫度下不斷攪拌抽提8h，離心過濾；殘渣加入2倍體積的水，于80℃抽提3小時，離心過濾；合并兩次提取液。將提取液配制成0.5molL^-1醋酸溶液，加入2％胃蛋白酶，在37℃下酶解4h，在85-100℃下滅酶5-10min，冷卻至常溫，離心，利用超濾技術分別收集不同分子量段的濾液，脫鹽濃縮干燥獲得活性肽制品。