[發明專利]水產品中無機砷的測定方法

有效

• 申請號: 200810013738.6
• 申請日: 2008-01-04
• 公開（公告）號: CN101261258A
• 公開（公告）日: 2008-09-10
• 發明（設計）人: 尚德榮;翟毓秀;寧勁松;王聯珠;冷凱良
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 青島聯智專利商標事務所有限公司
• 代理人: 袁和善

技術領域：

本發明屬于水產品檢測技術，是一種利用高效液相色譜-氫化物發生原子熒光光譜聯用(HPLC-HGAFS)形態分析技術測定水產品中無機砷的方法。

背景技術：

當前，元素分析化學的一項前沿內容是對元素的不同形態進行定性和定量，而不僅僅是測定元素的總量，這主要是因為同一元素的不同形態可能具有完全不同的化學和毒理性質，砷是其中的一個典型元素。砷的主要形態有：砷酸鹽As(V)、亞砷酸鹽As(III)、一甲基砷化合物(MMA)、二甲基砷化合物(DMA)、三甲基砷的氧化物(TMAO)、砷甜菜堿(AsB)、砷膽堿(AsC)和砷糖(AsS)等，其中無機砷(iAs)[包括As(V)、As(III)]的毒性很高；而有機砷中僅有MMA和DMA有較小的毒性，其它有機形態大多無毒，所以無機砷的含量基本能夠反映有毒砷的含量，這也是測量無機砷的衛生學基礎。砷在水產品中的主要存在形式有5種：iAs(劇毒)、DMA(低毒)、MMA(低毒)、AsB(無毒)、AsC(無毒)、AsS(無毒)。

現行的檢測方法“氫化物發生法”(GB/T5009.11-2003第一法)和“銀鹽法”(第二法)，在具體檢測結果方面存在較大缺陷。我們研究發現：①氫化物原子熒光法，在測量砷糖(AsS)含量較高的海藻類樣品時會出現誤報，原因在于在前處理過程中，砷糖(AsS)降解成小分子有機砷--二甲基砷(DMA)，在氫化物原子熒光光度計上有響應值，使得測量結果顯著偏高；②銀鹽法因受裝置配套不完善、環境溫度、鋅粒大小不均勻、手工操作精密度較差的影響，導致平行樣間誤差較大。

無機砷是水產品質量檢驗中主要的安全衛生指標，是產品質量標準中重要的限制性指標之一，其含量測定在質量檢測中具有重要的意義。2006年關于海藻食品中現國家衛生標準GB19643-2005《藻類制品衛生標準》中的限量指標和對國標GB/T5009.11-2003《(食品中總砷和無機砷的檢測方法》的爭議，已經引起國內各方面廣泛重視；目前國際上ISO和CAC標準中尚無測定水產中無機砷的方法標準。

發明內容：

本發明的目的是借助元素形態分析儀，使用高效液相色譜-氫化物發生原子熒光光譜聯用(HPLC-HGAFS)形態分析技術，對其砷的不同形態進行定性和定量分析，準確測定水產品中有劇毒的無機砷：砷酸鹽As(V)、亞砷酸鹽As(III)，準確測定其有低毒的MMA和DMA，從而給出更為準確可靠的生物學特性。

本發明是按照以下操作方法完成的：

本發明為高效液相色譜-氫化物發生原子熒光光譜聯用(HPLC-HGAFS)形態分析方法，包括：1、選用的儀器及設備，2、配置試劑與標準溶液，3、進行測試步驟，4、實驗所用的儀器條件，5、結果計算：

1.儀器及設備：HPLC-HGAFS聯用系統；

(1)、HPLC部分，使用LC-10ATVP高壓液相泵；配有100μL定量環的7725i六通進樣閥；配有相同材質填料保護柱(25mm×2.3mm?i.d，12-20μm)的PRP-X100(250mm×4.1mm?i.d，10μm)陰離子交換柱：

(2)、原子熒光光譜儀；配有激發光源：高性能砷空心陰極燈；形態分析測量軟件；(型號HGAFS-9130)；

(3)、水浴恒溫振蕩器(型號SHA-C)；

(4)、砂芯過濾器(型號SH/T0093)；

(5)、循環式真空泵(型號SHZ-D)；

(6)、酸度計(型號DELTA320)；

(7)、數控超聲清洗器(型號KQ-600DE)；

(8)、水系微孔濾膜(0.45μm)；

(9)、氬氣(純度≥99.99％)：

2、配置試劑與標準溶液；

(1)、試劑；

a、①鹽酸溶液(50％)：量取250mL濃鹽酸，慢慢加入250mL水中，混勻；②鹽酸溶液(7％)：量取280mL鹽酸，慢慢加入3720mL水中，混勻：

b、氫氧化鉀溶液(5g/L)：稱取氫氧化鉀5g溶于水中，并稀釋至1000mL：

c、硼氫化鉀溶液(15g/L)；稱取硼氫化鉀15g溶于1000mL氫氧化鉀溶液(5g/L)中：

d、HPLC流動相為15mmol/L(NH₄)₂HPO₄溶液，pH用10％甲酸調節至6，使用之前需經過0.45μm濾膜過濾并超聲脫氣：