[發明專利]水產品中無機砷的測定方法

有效

• 申請號: 200810013738.6
• 申請日: 2008-01-04
• 公開（公告）號: CN101261258A
• 公開（公告）日: 2008-09-10
• 發明（設計）人: 尚德榮;翟毓秀;寧勁松;王聯珠;冷凱良
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 青島聯智專利商標事務所有限公司
• 代理人: 袁和善

1、一種水產品中無機砷的測定方法，其特征在于它的方法為高效液相色譜-氫化物發生原子熒光光譜HPLC-HGAFS聯用形態分析方法，包括：(1)、選用的儀器及設備，(2)、配置試劑與標準溶液，(3)、進行測試步驟，(4)、實驗所用的儀器條件，(5)、結果計算；

(1)、儀器及設備：HPLC-HGAFS聯用系統；

1)、HPLC部分，使用LC-10ATVP高壓液相泵；配有100μL定量環的7725i六通進樣閥；配有相同材質填料保護柱25mm×2.3mm?i.d，12-20μm的PRP-X100250mm×4.1mm?i.d，10μm陰離子交換柱：

2)、HGAFS-9130原子熒光光譜儀；配有激發光源：高性能砷空心陰極燈；形態分析測量軟件：

3)、SHA-C水浴恒溫振蕩器；

4)、SH/T0093砂芯過濾器；

5)、SHZ-D循環式真空泵；

6)、DELTA320酸度計；

7)、KQ-600DE數控超聲清洗器；

8)、0.45μm水系微孔濾膜；

9)、氬氣：純度≥99.99％：

(2)、配置試劑與標準溶液；

1)、試劑；

a、①、50％的鹽酸溶液，量取250mL濃鹽酸，慢慢加入250mL水中，混勻；②、7％的鹽酸溶液：量取280mL鹽酸，慢慢加入3720mL水中，混勻：

b、5g/L的氫氧化鉀溶液：稱取氫氧化鉀5g溶于水中，并稀釋至1000mL：

c、15g/L的硼氫化鉀溶液；取硼氫化鉀15g溶于1000mL的5g/L氫氧化鉀溶液中：

d、HPLC流動相為15mmol/L(NH₄)₂HPO₄溶液，pH用10％甲酸調節至6，使用之前需經過0.45μm濾膜過濾并超聲脫氣：

所有的試劑均是分析純或是優級純，整個實驗都使用超純水；玻璃儀器使用前需經15％硝酸浸泡24h；

2)、砷的混合標準溶液：

CH₃AsO(ONa)₂·6H₂O(MMA)和Na₂HAsO₄·7H₂OAs(v)，(CH₃)₂AsO₂H(DMA)，1000μg/mL的As(III)標準儲備溶液：

a、通過溶解相應量的MMA、DMA、As(V)得到100ppb/mL的各單標溶液；將As(III)也稀釋至100ppb/mL，以上四種標液可在4℃冰箱存放備用：

b、混合砷標準溶液稀釋配制，臨用時現配：

將以上四種標液逐級稀釋至100mg/mL混合標準溶液，再根據下表1配制：

表1

???序號??濃度??mg/mL??定容體??積/mL??加入水??體積/mL??加入??10％HCl體??積/mL??加入100mg/mL四??種砷形態混合標準??溶液的體積/mL??1??5??10??7.0??2.5??0.5??2??20??10??4.5??2.5??2.0??3??50??10??2.5??2.5??5.0??4??75??10??/??2.5??7.5

(3)、進行測試步驟：

取經粉碎過40目篩的水產品干樣0.300g-3.000g于50mL具塞刻度試管中，加50％鹽酸的溶液20mL混勻，或取搗碎勻漿鮮樣2.000g-5.000g于50mL具塞刻度試管中，并用鹽酸(50％)溶液定容至25mL，混勻；至70℃水浴搖床1h，使試樣充分浸提；取出冷卻定容至25ml，脫脂棉過濾；取0.2mL上清液加入10ml管中；加入3.4mLH₂O；0.4mLH₂O₂混勻后在70℃度水浴放置20min，使As(III)氧化成As(V)；取出后用0.45微米的水系微孔濾膜過濾，上機測定無機砷值：

(4)、實驗所用的儀器條件；

1)、HPLC液相色譜條件：流動相15mmol/L(NH₄)₂HPO₄(pH?6.0)，流速1mL/min；進樣體積100μL；輔陰極46mA；蠕動泵轉速65rpm；

2)、HG氫化物發生條件：還原劑成分：1.5％KBH₄+0.5％KOH，流速：6.0mL/min；載流成分：7％HCl，流速：6.0mL/min；

3)、AFS原子熒光光譜條件：燈高性能砷空心陰極燈，193.7nm；負高壓285V；燈電流100mA；載氣氬氣，400mL/min；屏蔽氣氬氣，600mL/min；

(5)、結果計算：

1)、定性：開機后按上述條件進行設置，待穩定后，先做標準曲線，然后測定處理好的樣品溶液；在上述液相色譜和原子熒光條件下用進樣針吸取0.3-0.5mL，采用手動進樣器進行測定，用峰高或峰面積外標法定量；在上述色譜條件下亞砷酸鹽As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸鹽As(V)依次保留時間約為2.599min、3.221min、5.075min、8.994min；

2)、定量：待測樣品中亞砷酸鹽As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸鹽As(V)的色譜峰保留時間與標準溶液相比變化范圍在±5％之內即認為該待測定物質；

結果計算與表述：

用數據處理軟件中的外標法，繪制標準工作曲線，將標準工作曲線保存，然后將樣品峰分析處理，用外標校正，即可得到待測溶液中的亞砷酸鹽As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸鹽As(V)的濃度，按下面式(1)計算，可得試樣中待測物的含量：

X＝C×V×F/m×1000...............????????(1)

式中：

X-樣品中待測物的含量，mg/kg；

C-待測液中無機砷的濃度，ng/ml；

m-稱樣量，g；

V-測定液體總體積，mL；

F-稀釋倍數。