[發(fā)明專(zhuān)利]生物發(fā)酵混合菌液及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810013495.6
• 申請(qǐng)日: 2008-09-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101362992A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-02-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 時(shí)聞迅
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 時(shí)聞迅
• 主分類(lèi)號(hào): C12G3/02
• 分類(lèi)號(hào): C12G3/02;C12N1/16;C12N1/14;C12N1/20;C12R1/865;C12R1/69;C12R1/645;C12R1/01
• 代理公司: 大連智慧專(zhuān)利事務(wù)所
• 代理人: 周志艦

1.一種生物發(fā)酵混合菌液的制備方法，其特征在于：

(1)酒精酵母菌液的制備方法如下：

①制備斜面試管菌種，采用14-15Bx，PH5.0-6.0米曲汁：瓊脂重量 比為100∶2培養(yǎng)基，經(jīng)制作、滅菌、擺成斜面、干燥排潮、無(wú)菌檢 查后，采用劃線(xiàn)法接入酒精酵母-K號(hào)原菌，在28--30℃溫度培養(yǎng) 4-6天，

②、三角瓶培養(yǎng)，取13-15Bx，PH5.0-6.0米曲汁，經(jīng)滅菌，冷卻，無(wú) 菌檢查，接入試管菌種，在28-31℃溫度培養(yǎng)24小時(shí)，

③、種子罐培養(yǎng)，取13-15Bx、PH值為5.0-6.0米曲汁，經(jīng)滅菌， 冷卻，接入上述三角瓶酵母菌在28-31℃培養(yǎng)12小時(shí)，種子罐中米 曲汁與三角瓶酵母菌的重量比為100∶5；

(2)米曲霉糖化菌液的制備方法如下：

①、制備試管菌株，取11Bx米曲汁，加2％瓊脂，經(jīng)制作、滅菌、干 燥排潮后，接種3758或3800曲霉菌、在28-31℃溫度培養(yǎng)4-6天，

②、種曲培養(yǎng)，取加入70-80％水的麥麩，翻拌均勻，用1kg/cm²蒸 汽蒸料0.5-1小時(shí)，冷卻后接入上述試管菌種，它們均在30-32℃ 培養(yǎng)72-80小時(shí)，即得成熟種曲孢子菌液，

③、制備液體曲，該液體曲培養(yǎng)基含有重量比分別為10％的8-10Bx 米曲汁，20％的麩皮，10％的苞米面，0.05-0.1％的營(yíng)養(yǎng)鹽以及 59.9-59.95％的水，該液體曲培養(yǎng)基，經(jīng)滅菌、冷卻，接入0.1-0.4％ 上面培養(yǎng)的種曲孢子菌液，在通風(fēng)、供氧條件下于28-33℃培養(yǎng) 15-20小時(shí)至糖化力達(dá)到3800-5500單位即可；

(3)生香酵母菌液的制備方法如下：

①、制備試管菌種，取13-15Bx米曲汁，加2％瓊脂，經(jīng)制作、滅菌， 擺成斜面，干燥排潮后，用劃線(xiàn)法接種生香酵母菌，在28-31℃溫度 培養(yǎng)4-6天，

②、三角瓶培養(yǎng)，取12-14Bx米曲汁培養(yǎng)基，經(jīng)滅菌、冷卻、接入 試管菌種培養(yǎng)，在28-30℃溫度培養(yǎng)24小時(shí)，

③、種子罐培養(yǎng)，取12Bx米曲汁，加入0.03-0.05％的營(yíng)養(yǎng)鹽，制 作成液體曲培養(yǎng)基，經(jīng)滅菌、冷卻、接入5％上面三角瓶菌種，在28-31 ℃培養(yǎng)12小時(shí)即可；

(4)丁酸菌液的制備方法如下：

①、制備試管菌種，采用牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、葡萄糖、酵母膏、 玉米漿、碳酸鈣及水組成培養(yǎng)基，它們?cè)诨旌弦褐兴嫉闹亓勘确謩e 為：1％、5％、1.5％、5％、0.15％、0.15％、0.5％、86.7％，并用堿液將 其PH值調(diào)至7.0-7.2.經(jīng)制作、滅菌、擺成斜面、干燥排潮、無(wú)菌 檢查后，接種丁酸菌種，在30-33℃溫度培養(yǎng)4-5天，

②、三角瓶培養(yǎng)：三角瓶中的培養(yǎng)基是由重量比分別為0.3％的牛肉 膏、1％的蛋白胨、5％的葡萄糖、0.15％的酵母膏、0.15％的玉米漿、0.5％ 的碳酸鈣、0.25％的磷酸氫二鉀及92.65％的水組成的，并用堿液將其 PH值調(diào)至7.0-7.2，再用1kg/cm²壓力蒸汽滅菌12分鐘，冷卻后接入 試管菌種于30-33℃培養(yǎng)36-48小時(shí)，

③、擴(kuò)大培養(yǎng)：培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件均與上述三角瓶培養(yǎng)相同，

(5)將上面制得的酒精酵母菌、米曲霉糖化菌液、生香酵母菌及丁酸菌 液按如下重量百分比混合，即酒精酵母菌30-60％、米曲霉糖化菌液 20-30％、生香酵母菌10-20％及丁酸菌液10-20％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物發(fā)酵混合菌液的制備方法，其特征在 于：米曲汁的制備方法如下：

i、精選優(yōu)質(zhì)大米，用水沖洗至無(wú)白色水液，然后在常溫水中浸泡8-16 小時(shí)，使大米含水量在20-30％，控凈表面水分，

ii、將控完水的大米按壓氣法均勻裝入蒸米鍋中，園氣后常壓蒸米 50-60分鐘，然后降溫至30℃，

iii、接種3758或3800曲霉菌，在28-35℃溫度培養(yǎng)36-40小時(shí)， 即得成熟米曲，

IV、將上述米曲與水按1∶3重量比混合，加熱使溫度在58-60℃糖 化4小時(shí)，攪拌均勻，過(guò)濾，得到的產(chǎn)物即為米曲汁。