[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200810012743.5
• 申請(qǐng)日: 2008-08-07
• 公開（公告）號(hào): CN101344527A
• 公開（公告）日: 2009-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 華子昂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華子昂
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;C12Q1/00
• 代理公司: 大連科技專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 于忠晶

1、一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片，其特征是：BSA-NHS玻片上固定有靶蛋白血管緊張素轉(zhuǎn)換酶或肽基二肽水解酶。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片，其特征是：玻片上的靶蛋白分為若干個(gè)區(qū)域，區(qū)域間為親水處理帶。

3、一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片的制法，其特征是：具體步驟為：

第一步玻片制作：N，N-碳酸雙羥琥亞胺酯(100mmol/L)和N，N-二異丙基乙胺(100mmol/L)溶于無水N，N-二甲基甲酰胺中配制成混合液，將醛基化玻片浸入上述混合液中室溫條件下浸泡3h，取出玻片后用95％乙醇沖洗玻片兩次，再將玻片浸入磷酸鹽緩沖液中室溫下浸泡12h，取出玻片先后用蒸餾水沖洗玻片兩次、95％乙醇沖洗玻片兩次，離心以甩掉多余溶液，最后將玻片浸入N，N-二甲基甲酰胺中室溫下放置3h，取出玻片后用95％乙醇沖洗玻片4遍，離心即成為BSA-NHS玻片，室溫下貯存于真空干燥器中，2個(gè)月無明顯的活性丟失；

第二步固定靶蛋白：待固定的靶蛋白溶于40％的甘油和60％的磷酸鹽緩沖液的混合液，靶蛋白終濃度為100μg/ml，將上述靶蛋白溶液用點(diǎn)樣機(jī)點(diǎn)至第一步制得的醛基化玻片上，室溫濕室放置3h，倒轉(zhuǎn)玻片浸入磷酸鹽緩沖液中，一分鐘后取出玻片并將玻片正向浸入BSA溶液中，室溫下輕度振蕩放置1h，取出玻片，用磷酸鹽緩沖液沖洗玻片即制得用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片。

4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片的制法，其特征是：第一步玻片制作：N，N-碳酸雙羥琥亞胺酯(100mmol/L)和N，N-二異丙基乙胺(100mmol/L)溶于無水N，N-二甲基甲酰胺中，三者按1∶1∶2重量比配制成混合液，將醛基化玻片浸入上述混合液中室溫條件下浸泡3h，取出玻片后用95％乙醇沖洗玻片兩次，再將玻片浸入濃度0.2mol/L磷酸鹽緩沖液中室溫下浸泡12h，取出玻片先后用蒸餾水沖洗玻片兩次、95％乙醇沖洗玻片兩次，離心以甩掉多余溶液，最后將玻片浸入濃度99％的N，N-二甲基甲酰胺中室溫下放置3h，取出玻片后用95％乙醇沖洗玻片4遍，離心即成為BSA-NHS玻片，室溫下貯存于真空干燥器中，2個(gè)月無明顯的活性丟失；

第二步固定靶蛋白：待固定的靶蛋白溶于40％的甘油和60％的磷酸鹽緩沖液的混合液，靶蛋白終濃度為100μg/ml，將上述靶蛋白溶液用點(diǎn)樣機(jī)點(diǎn)至第一步制得的醛基化玻片上，室溫放置3h，倒轉(zhuǎn)玻片浸入0.2mol/L磷酸鹽緩沖液中，一分鐘后取出玻片并將玻片正向浸入20μg/mL?BSA溶液中，室溫下輕微振蕩放置1h，取出玻片，用0.2mol/L磷酸鹽緩沖液沖洗玻片即制得用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片。

5、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片的制法，其特征是：第二步固定靶蛋白：蛋白點(diǎn)樣至玻片上室溫下放置3h，倒轉(zhuǎn)浸入磷酸鹽緩沖液一分鐘后取出玻片并將玻片正向浸入甘氨酸溶液，室溫下輕微振蕩放置1h，取出玻片即制得用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片。

6、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片的制法，其特征是：醛基化玻片為30CMT-GAP玻片，表面帶有氨基，

7、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于檢測(cè)具有降壓功能的藥物成分的蛋白芯片的制法，其特征是：靶蛋白在玻片上被分為若干區(qū)域，區(qū)域間做疏水處理。