[發明專利]一種抗HCV的疫苗及其制備方法和用途無效
| 申請號: | 200780052831.1 | 申請日: | 2007-12-18 |
| 公開(公告)號: | CN101663399A | 公開(公告)日: | 2010-03-03 |
| 發明(設計)人: | 魏來;田園 | 申請(專利權)人: | 北京大學人民醫院 |
| 主分類號: | C12N15/51 | 分類號: | C12N15/51;C12N15/85;C12N15/86;C12N15/861;C07K14/18;A61K48/00;A61P1/16;A61P31/14 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產權代理有限公司 | 代理人: | 謝順星 |
| 地址: | 中國北京*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 hcv 疫苗 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一種抗HCV的疫苗,其是通過將HCV的非結構基因串聯組合后與腺病毒載體重組制備而成,其特征在于,所述的非結構基因串聯組合為NS3/NS4或NS4/NS5。
2.根據權利要求1所述的疫苗,其特征在于,所述的腺病毒為復制缺陷型Ad5。
3.一種制備權利要求1或2所述疫苗的方法,其包括步驟:
1)制備目的基因:設計引物,通過RT-PCR擴增出HCV?NS3/NS4或NS4/NS5基因;
2)將HCV?NS3/NS4或NS4/NS5基因克隆至Pshuttle-CMV質粒,具體為:將所述基因分別和所述質粒按摩爾比3:1進行連接;
3)將攜帶目的基因的Pshuttle-CMV質粒與腺病毒骨架質粒Adeasy1重組;
4)酶切步驟3)得到的重組質粒,釋放腺病毒基因組,脂質體轉染293細胞、反復凍融2-3次,CsCl密度梯度離心,然后將純化后的基因組結構均一的重組腺病毒凍存。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,RT-PCR擴增的引物為:
。
5.權利要求1或2所述的疫苗在制備治療丙型肝炎的藥物中的應用。
6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,所述的藥物是載體疫苗與免疫增強劑的混合物。
7.根據權利要求6所述的應用,所述的免疫增強劑為IL-12、脫氧核苷酸或大腸桿菌DNA形式的未甲基化的CpG基序、CaCl2、PEG6000或Freund′s佐劑中的一種或多種。?
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