[發明專利]多價肺炎球菌多糖-蛋白質綴合物組合物

有效

• 申請號: 200780051661.5
• 申請日: 2007-12-10
• 公開（公告）號: CN101610785B
• 公開（公告）日: 2009-12-23
• 發明（設計）人: W·P·豪斯多夫;G·R·西貝爾;P·R·帕拉迪索;A·K·普拉薩德
• 申請（專利權）人: 惠氏公司
• 主分類號: A61K39/09
• 分類號: A61K39/09;C07K19/00;C07K14/34;C07K14/315
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 黃革生;林柏楠

1.制備包含與載體蛋白共價連接的肺炎鏈球菌(Streptococcus? pneumoniae)血清型3多糖的免疫原性綴合物的方法，所述方法包括

(a)使純化的血清型3多糖與選自乙酸、檸檬酸或碳酸的溫和的酸反 應，得到水解的血清型3多糖；

(b)在二價陽離子的存在下使水解的血清型3多糖與氧化劑反應，得 到活化的血清型3多糖，其中所述的氧化劑是高碘酸且二價陽離子是Mg²⁺或Ca²⁺；

(c)使活化的血清型3多糖與載體蛋白混合；

(d)使混合且活化的血清型3多糖和載體蛋白與還原劑反應，得到血 清型3多糖：載體蛋白綴合物；和

(e)封閉血清型3多糖：載體蛋白綴合物中未反應的醛，得到包含與載 體蛋白共價連接的肺炎鏈球菌血清型3多糖的免疫原性綴合物；

其中所述載體蛋白選自：白喉類毒素；破傷風類毒素、百日咳類毒素、 霍亂類毒素、大腸桿菌LT、大腸桿菌ST、來自銅綠假單胞菌(Pseudomonas? aeruginosa)的外毒素A；外膜復合體c(OMPC)、孔蛋白、轉鐵蛋白結合 蛋白、肺炎球菌溶血素、肺炎球菌表面蛋白A(PspA)、肺炎球菌黏附素蛋 白(PsaA)、來自A組或者B組鏈球菌的C5a肽酶、流感嗜血桿菌蛋白D； 卵白蛋白；匙孔血藍蛋白(KLH)；牛血清白蛋白(BSA)或者結核菌素 的純化的蛋白質衍生物(PPD)。

2.權利要求1的方法，還包括在與載體蛋白混合前純化活化的血清型 3多糖。

3.權利要求1或2的方法，還包括在與還原劑反應前，共同凍干所述 混合且活化的血清型3多糖和載體蛋白。

4.權利要求1或2的方法，還包括純化免疫原性綴合物。

5.權利要求1或2的方法，其中所述的溫和的酸是乙酸。

6.權利要求1或2的方法，其中所述的載體蛋白是CRM₁₉₇。

7.權利要求1或2的方法，其中所述的還原劑是氰基硼氫化鈉。

8.權利要求1或2的方法，其中封閉未反應的醛包括使血清型3多糖： 載體蛋白綴合物與硼氫化鈉反應。

9.制備包含與載體蛋白共價連接的肺炎鏈球菌血清型3多糖的免疫原 性綴合物的方法，所述方法包括：

(a)使純化的血清型3多糖與乙酸反應，得到水解的血清型3多糖；

(b)在MgCl₂的存在下使水解的血清型3多糖與高碘酸反應，得到活 化的血清型3多糖；

(c)純化活化的血清型3多糖；

(d)使活化的血清型3多糖與載體蛋白混合；

(e)共同凍干混合且活化的血清型3多糖和載體蛋白；

(f)使共同凍干且活化的血清型3多糖和載體蛋白與氰基硼氫化鈉反 應，得到血清型3多糖：載體蛋白綴合物；和

(g)用硼氫化鈉封閉血清型3多糖：載體蛋白綴合物中未反應的醛，得 到包含與載體蛋白共價連接的肺炎鏈球菌血清型3多糖的免疫原性綴合 物；

其中所述載體蛋白選自：白喉類毒素；破傷風類毒素、百日咳類毒素、 霍亂類毒素、大腸桿菌LT、大腸桿菌ST、來自銅綠假單胞菌(Pseudomonas? aeruginosa)的外毒素A；外膜復合體c(OMPC)、孔蛋白、轉鐵蛋白結合 蛋白、肺炎球菌溶血素、肺炎球菌表面蛋白A(PspA)、肺炎球菌黏附素蛋 白(PsaA)、來自A組或者B組鏈球菌的C5a肽酶、流感嗜血桿菌蛋白D； 卵白蛋白；匙孔血藍蛋白(KLH)；牛血清白蛋白(BSA)或者結核菌素 的純化的蛋白質衍生物(PPD)。

10.權利要求9的方法，還包括純化所述免疫原性綴合物。

11.權利要求9或10的方法，其中所述的載體蛋白是CRM₁₉₇。