[發(fā)明專利]測定異質性細胞群中的小細胞群的方法和裝置

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200780048573.X
• 申請日: 2007-12-14
• 公開（公告）號: CN101606065A
• 公開（公告）日: 2009-12-16
• 發(fā)明（設計）人: P·施溫特;I·阿比斯西爾
• 申請（專利權）人: 麥迪奧診斷產品股份公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 余 穎

技術領域

本發(fā)明涉及用于測定異質性細胞群中的小細胞群的方法。所述方法適于濃 縮和定量測定異質性細胞群中的小細胞群，例如在胎母輸血中；用于平行地測 定多種細胞結合分析物，并且因此可在胎母輸血情形或嵌合體情形中用于在輸血之后測定混合場反應(Mischfeldreaktionen)中的細胞群；用 于檢測以低濃度存在于細胞上的分析物；和/或用于測定血細胞比容值。本發(fā)明 還提供適于所述方法的裝置。

背景技術

FMH

在妊娠過程中，血液有規(guī)律地從胎兒循環(huán)流入母體循環(huán)(胎母輸血 (fetomaternal?hemorrhage)，F(xiàn)MH)。根據(jù)文獻資料記載，這一輸血量為0.1ml至 大約30ml；在大約96-98％的妊娠中，F(xiàn)MH小于2ml，但是在0.3％的妊娠中， 超過30ml。估計母體血液量為5000ml，這就意味著有0.002％至0.6％抗原性 質與母體不同的另一種紅細胞進入母體循環(huán)，如果由此產生免疫反應則可能變 成臨床問題。最為顯著的例子是一個D型母親懷有一個D+型胎兒。如果母親 產生抗-D抗體，那么再次懷上D+型胎兒時可能產生致命的結果(新生兒溶血 病，HDN)。由于這一原因，在這些情況下需對母親實施“抗-D預防”。盡管如 此，人們對能夠由此估計FMH量仍有極大的興趣，因為，例如在FMH＞30ml 時，標準的抗-D療法無法提供足夠的保護。因此，在美國，標準免疫包括250 至300μg的抗-D(IgG)，這足以為自身母體循環(huán)接收15ml的胎兒紅細胞也就是 25至30ml的胎兒血液的妊娠婦女提供足夠保護。歐洲的標準劑量通常低些， 即100至150μg抗-D(IgG)，這能為FMH為8-10ml的妊娠婦女提供保護。每 個實施抗-D預防的機構都必須設法檢測超過標準的FMH(Issitt?PD和Anstee DJ.在：應用血型血清(Applied?Blood?Group?Serology)[第4版]，蒙哥馬利科學出 版社(Montgomery?Scientific?Publication)，第41章：新生兒溶血病(Hemolytic disease?of?the?newborn)，第1045-1050頁)。

傳統(tǒng)的血型-血清分析，例如用于檢測D抗原的分析，根本不能檢測如上 所述如此小量的異質細胞群。

因此，曾開發(fā)了許多專門用于檢測FMH的不同的分析方法。這些分析方 法檢測胎兒紅細胞，血型抗原D或血紅蛋白F。

FMH檢測測試：????????????FMH檢測限

Rosette測試：????????????大約10ml

這一測試方法基于對紅細胞聚集的檢測及顯微鑒定。胎兒D抗原檢測。

(Jones?A.R.，Sliver?S.Blood?1958；13：763

Sebring?E.S.，Polesky?H.F.Transfusion?1982；22：468

Sebring?E.S.in：Hemolytic?disease?of?the?newborn.

Arlington，VA；Am?Assoc?Blood?Banks?1984：87.)

Kleihauer-Betke測試??????大約5ml

這一測試方法基于胎兒紅細胞對酸性洗提的較高的抵抗力及對其進行的 顯微鑒定。胎兒細胞檢測。

(Kleihauer?E.，Braun?H.，Betke?K.Klein?Wschr?1957；35：637.)

流式細胞儀???????????????大約1ml

D抗原或血紅蛋白F用相應的抗體標記，用發(fā)熒光的第二抗體檢測。胎兒 D抗原/血紅蛋白檢測。

Garratty?G.，Arndt?P.Transfusion?1995；35：157.

David?B.H.Clin?Lab?Med?2001；21：829.

抗體消耗測試：???????????大約15ml

這一測試方法是一種基于常規(guī)血型測定方法(凝膠技術)的FMH測定法。它 是基于胎兒紅細胞對抗-D試劑的消耗。反應上清液用D-陽性測試細胞孵育， 然后象在凝膠測試中那樣離心。胎兒D抗原檢測。

Lapierre?Y.，Rigal?D.，Adam?J.，Josef?D.，Meyer?F.，Greber?S.，Drot?C.Transfusion 1990；30：109.