[發明專利]測定異質性細胞群中的小細胞群的方法和裝置

無效

• 申請號: 200780048573.X
• 申請日: 2007-12-14
• 公開（公告）號: CN101606065A
• 公開（公告）日: 2009-12-16
• 發明（設計）人: P·施溫特;I·阿比斯西爾
• 申請（專利權）人: 麥迪奧診斷產品股份公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 余 穎

1.一種用于測定液體樣品中的一種或多種細胞結合分析物的方法，所述 方法使用包括以下部件的裝置進行：

-至少一個用于施加液體樣品的進樣區域(5)，

-適于細胞成分透過的多孔膜(2)，所述膜上具有至少一個指示劑區域， 所述指示劑區域能夠與細胞結合分析物相互作用并且包含至少一個針對細胞 結合分析物的結合元素，以及

-至少一個位于膜上的吸收區域(3)，在液體通過指示劑區域后吸收液體，

其中，所述至少一個指示劑區域位于進樣區域(5)和吸收區域(3)之間，所述 方法用于在例如母嬰輸血或嵌合體等情形中濃縮和定量測定異質性細胞群中 的小細胞群，用于檢測以低濃度存在于細胞上的分析物，用于測定血細胞比容 值和/或用于測定混合-場反應中的細胞結合分析物。

2.根據權利要求1所述的方法，包括以下步驟：

a)將包含細胞的樣品加至進樣區域；

b)施加稀釋劑；

c)進行測試；

d)通過測定細胞是否結合于指示劑區域來評定測試。

3.根據權利要求2所述的方法，所述方法用于測定胎母輸血(FMH)，其中， 樣品包含紅細胞，指示劑區域以包含抗體或抗體混合物為佳。

4.根據權利要求2所述的方法，所述方法用于測定以低濃度存在于細胞 上的分析物，優選弱D血型，特別是DEL，其中指示劑區域以包含抗體或抗 體混合物為佳。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，進一步包括，在步驟a)之前， 通過離心血液樣品制備紅細胞沉淀物；用菠蘿蛋白酶，木瓜蛋白酶或無花果蛋 白酶孵育沉淀物和重懸經酶處理的沉淀物。

6.根據權利要求2-5中任一項所述的方法，在步驟a)中加大約100μl至 500μl的血液樣品或重懸的紅細胞沉淀物。

7.根據權利要求2-6中任一項所述的方法，其中，步驟b)中加大約100μl 至200μl的稀釋劑。

8.根據權利要求2-6中任一項所述的方法，其中，抗-D抗體選自RUM-1， LDM-3，ESD1M，TH-28，MS-201，MS-26和LDM-1。

9.根據權利要求1所述的方法，其中，所述裝置包括至少兩個在流動方 向上依次前后設置的指示劑區域，設置的方式使得樣品液體在每一條流動路徑 上通過超過一個指示劑區域，其中，指示劑區域包含針對細胞結合分析物的結 合元素，并且所述方法包括：

a)將包含紅細胞的血液樣品加至進樣區域；

b)將稀釋劑加至進樣區域；

c)進行測試；

d)通過測定紅細胞是否結合于指示劑區域來評定測試；

其中，所述方法用于在胎母輸血(FMH)情形中平行測定多種細胞結合分析 物，用于混合場反應中的測定，用于檢測異體輸血或者用于測定血細胞比容值。

10.根據權利要求9所述的方法，所述方法用于測定血細胞比容值，其中， 所述指示劑區域以包括抗體或抗體混合物為佳，在步驟d)中測定紅細胞與指示 劑區域的整體結合模式。

11.根據權利要求10所述的方法，所述裝置包括至少兩個設置在單條流 動路徑中的指示劑區域，所述指示劑區域包含針對相同細胞結合分析物的相同 結合元素。

12.根據權利要求10或11所述的方法，所述裝置具有至少兩條流動路徑， 所述流動路徑包含至少兩個指示劑區域，并且結合元素的濃度從相對于進樣區 域的近端至遠端遞增或遞減。

13.根據權利要求10至12中任一項所述的方法，所述裝置具有至少兩條 流動路徑，所述流動路徑包含至少兩個指示劑區域，并且，一條流動路徑中抗 體的濃度不同于另一條流動路徑中抗體的濃度。