[發明專利]表達靶向內腔蛋白質的轉質體植物

無效

• 申請號: 200780025329.1
• 申請日: 2007-07-02
• 公開（公告）號: CN101484582A
• 公開（公告）日: 2009-07-15
• 發明（設計）人: E·佩吉特;M·杜巴爾德;J·巴利
• 申請（專利權）人: 拜耳生物科學股份有限公司;中央科學研究中心
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 余 穎

1.一種嵌合型基因，其包含按照轉錄方向以功能方式彼此相連的：

a)來自質體性植物基因的啟動子，

b)編碼細菌信號肽的核酸序列，其翻譯性融合于，

c)編碼感興趣肽的異源核酸序列，

d)任選的在植物細胞的質體中有活性的終止子。

2.一種指定用于轉化植物質體的載體，其特征在于，所述載體含有至少 兩條與待轉化植物的原質體系中序列同源的序列，所述同源序列側接至少一個 權利要求1所述的嵌合型基因。

3.一種轉質體植物細胞，其特征在于，所述細胞含有至少一種權利要求1 所述的嵌合型基因。

4.一種轉質體植物和/或其后代，其包含權利要求3所述的轉質體植物細 胞。

5.如權利要求4所述的轉質體植物和/或其后代，其特征在于，所述轉質 體植物和/或其后代屬于藻類、浮萍科、煙草屬植物、馬鈴薯、番茄、油菜、 蕓苔、大米、棉花或大豆植物。

6.如權利要求4或5所述植物的可收獲部分，所述可收獲部分含有如權 利要求3所述的轉質體植物細胞。

7.一種產生如權利要求4所述轉質體植物和/或其后代的方法，該方法包 括：

a)用至少一種嵌合型基因轉化植物細胞，所述嵌合型基因包含按照轉錄 方向以功能方式彼此相連的以下部分：在質體中具有活性的啟動子序列，編碼 細菌信號肽的核酸序列，所述核酸序列翻譯性融合于編碼某肽的異源核酸序 列，和任選的在植物細胞質體中具有活性的終止子；

b)從步驟a)獲得的植物細胞再生植物，和

c)任選地，從步驟b)獲得的植物產生更多植物。

8.一種在轉質體植物細胞的類囊體內腔中產生感興趣肽的方法，所述方 法包括以下步驟：

a)將嵌合型基因引入植物細胞，所述嵌合型基因包含：

-在植物質體中有功能的啟動子，其操作性連接于

-編碼細菌信號肽的核酸序列，所述核酸序列翻譯性融合于編碼所述感興 趣肽的核酸序列，和

-任選的在植物細胞的質體中具有活性的終止子，從而獲得轉質體植物細 胞；

b)將該轉質體植物細胞置于允許表達該嵌合型基因和隨后切除信號肽的 條件下。

9.一種產生在轉質體植物細胞類囊體內腔中表達感興趣肽的轉質體植物 的方法，所述方法包括以下步驟：

a)將某構建物引入植物細胞，所述構建物包含：

-在植物質體中有功能的啟動子，其操作性連接于

-編碼細菌信號肽的核酸序列，所述核酸序列翻譯性融合于編碼所述感興 趣肽的核酸序列，和

-任選的在植物細胞的質體中具有活性的終止子，從而獲得轉質體植物細 胞；

b)將該轉質體植物細胞置于允許表達該嵌合型基因和隨后切除信號肽的 條件下，和

c)選擇該轉質體植物細胞。

10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法還包括從該轉質體 植物細胞再生植物的步驟。

11.如權利要求8-10中任一項所述的方法，其特征在于，所述感興趣肽是 非甲硫氨酸N-末端肽。

12.一種在轉質體植物細胞的類囊體內腔中獲得含二硫鍵的感興趣肽的 方法，所述方法包括以下步驟：

a)將某嵌合型基因引入植物細胞，所述基因包含：

-在植物質體中有功能的啟動子，其操作性連接于

-編碼細菌信號肽的核酸序列，所述核酸序列翻譯性融合于編碼所述感興 趣肽的核酸序列，和

-任選的在植物細胞的質體中具有活性的終止子，從而獲得轉質體植物細 胞；

b)將該轉質體植物細胞置于允許表達該嵌合型基因和隨后切除信號肽的 條件下。