[發明專利]用于診斷和治療應用的不同類型的血型抗原

無效

• 申請號: 200780010334.5
• 申請日: 2007-03-23
• 公開（公告）號: CN101405603A
• 公開（公告）日: 2009-04-08
• 發明（設計）人: J·霍格爾森;J·劉;L·布喬恩斯特羅姆;P·格魯夫曼
• 申請（專利權）人: 阿布桑伯AB公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/80;G01N33/543
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司
• 代理人: 過曉東

技術領域

本發明一般涉及用于治療或預防抗體-調節的移植排斥的組合物和方法，更具體地，涉及包括血型決定簇的組合物，所述血型決定簇能夠有效的除去抗血型抗原的抗體。

背景技術

早在移植的前期就發現穿過ABO血型屏障的腎移植會導致大范圍的不發生作用的移植，因此，遵守傳統的用于輸血的蘭斯坦納法則被認為是異體移植的先決條件。受贈者預先形成的抗A/B同種凝集素造成針對ABO血型-不相容移植物超急性排斥反應。這種超急性排斥反應與在帶有供體者反應性人體白細胞抗原-抗體同種免疫病人體內觀察到的反應相似。第一個跨越ABO血型屏障的移植手術在二十世紀七十年代開始，是將A2血型的尸體腎臟移植到O型血的受贈者體內¹。在二十世紀八十年代，使用A₁和B型血捐獻者進行第一組的ABO血型不相容的活體捐贈者(LD)腎移植，且存活下來的移植受贈者與ABO血型相容的情況相似。這種免疫抑制草案包括前期進行血漿除去法除去抗A/B抗體、捐贈者血小板輸血、脾切除術和用抗淋巴細胞/胸腺細胞球蛋白進行的誘導治療、注射從豬胃中萃取出的A或B血型的物質和環孢霉素-硝基咪唑硫嘌呤-強的松。從那以后，在世界范圍內報道了超過500個ABO血型不相容活體捐贈者腎移植手術，主要是日本報道(參見¹)，有很多文件證明了移植之前減少受贈者抗A/B抗體水平從而避免排異性的重要性。^2-3這一組移植手術幸存者情況比較好(大約85％的A1和B型捐贈者的移植存活期是1年)但是由于單個案例發生嚴重的抗A/B抗體調節的排異作用^4，5，因此這一情況略遜于ABO血型相容的移植術。

使用抗CD20抗體(Rituximab)與除去抗體相結合進行ABO血型不相容的腎移植，在這方面最近的數據顯示了更好的移植存活情況^6，7。

在器官嚴重不足的情況下，增加使用來自ABO血型不相容的捐贈者中的移植物能夠進行更多的活體捐獻者腎移植。另外，在此方面獲得的經驗還可以用在人體白細胞抗原-致敏病人的預處理和后移植處理⁸。

發明內容

本發明部分地以用于從血漿中除去血型抗原抗體的改進的組合物和方法，以及血型鑒定方法為基礎。

在本發明的一個方面，本發明提供了一種組合物，這種組合物包含至少兩種血型抗原，每種血型抗原在不同核心糖化物鏈式上表達。優選的組合物包含2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或更多的血型A/B抗原。

在另一個方面，通過提供不同子類型的微磁珠確定(例如血型測定)來自主體的樣品中血型抗體的存在，其中每個子類型都包覆有不同的血型抗原，并將來自主體的樣品加入到微磁珠中。將樣品和微磁珠培養足夠長的時間使樣品中抗血型抗體與血型抗原在微磁珠上相結合，形成一種抗血型抗體-微磁珠復合物。培養這種復合物，例如，與至少一種標記物標記過的更具體地說能夠結合所述抗血型抗體的配位體相接觸培養，所述抗血型抗體能夠與血型抗原相結合，檢測是否存在這種結合抗血型抗體的標記過的配位體可以確定所述反應性抗體的存在。這種配位體可以是，例如，一種抗體或其片段。這種抗體是一種單價抗體片段，例如Fab或Fab′片段。例如，Fab或Fab′片段可以是一種抗Fc抗體片段、一種抗kappa輕鏈抗體片段、一種抗λ輕鏈抗體片段、和單鏈抗體片段。所述標記物例如一種熒光標記物。通過本領域移植的方法，例如流式細胞計或luminex液態芯片(蛋白分析系統)可以測定標記的配位體。

通過提供大量不同子類型的微磁珠除去樣品中的血型反應性抗體，其中，所述不同子類型的微磁珠上包覆有不同的血型抗原。將樣品和這些微磁珠相接觸并培養足夠長的時間，使樣品中的抗血型抗體與血型抗原相結合。微磁珠與樣品分離，從而從樣品中除去血型反應性抗體。

血型抗原包括A型抗原、B型抗原和H型抗原。核心糖化物鏈類型包括1型、2型、3型和4型。血型抗原不含有糖化物(在這里是指ABO血型低聚糖或任選的，血型抗原在粘蛋白多肽上表達。這里的粘蛋白多肽是粘蛋白免疫球融合蛋白質(在這里是指ABO融合蛋白質或多肽)的一部分。

任選的，ABO低聚糖或ABO融合蛋白質與一種固體支持物，例如微磁珠相連，例如共價相連或非共價相連。例如，微磁珠可以是橡膠的。通過不同的子類型的微磁珠是指微磁珠的大小、顏色不同，或者大小及顏色都不同。微磁珠的直徑在大約2微米到大約15微米的范圍內。優選的，所述微磁珠直徑大約為5微米。最優選的，所述微磁珠直徑大約為5微米。