[發明專利]評估解凍細胞的存活能力的方法

無效

• 申請號: 200780010271.3
• 申請日: 2007-01-26
• 公開（公告）號: CN101405387A
• 公開（公告）日: 2009-04-08
• 發明（設計）人: 亨利·J·利斯;弗蘭切斯卡·D·霍頓
• 申請（專利權）人: 諾沃塞勒斯有限公司
• 主分類號: C12N5/06
• 分類號: C12N5/06;C12N5/08;G01N33/50
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所
• 代理人: 史 悅

1.一種評估解凍細胞的存活能力的方法，其中所述細胞是配子、胚胎、 核體、推定的干細胞群體、干細胞前體群體或者干細胞群體，所述方法包括 在含有眾多氨基酸的培養基中培育解凍細胞和測定該培養基中至少一種氨 基酸的濃度變化。

2.根據權利要求1的方法，其還包括如果所述變化滿足預定的標準則 選擇所述的解凍細胞用于進一步發育的步驟。

3.根據權利要求1或2的方法，其中培養基包含Earle′s平衡鹽溶液， 所述Earle′s平衡鹽溶液補充有葡萄糖、L-乳酸、丙酮酸以及氨基酸的生理混 合物。

4.根據任意前述權利要求的方法，其中使用HPLC然后是以鄰苯二甲 醛的衍生化來測量在已用的培養基中氨基酸的濃度。

5.根據任意前述權利要求的方法，其中產生了氨基酸消耗或生成模式。

6.根據權利要求5的方法，其中所述氨基酸消耗或生成模式整體上用 作評估解凍細胞的存活能力的選擇標記。

7.根據權利要求6的方法，其中最有活力的解凍細胞的選擇是基于通 常包括2至7種氨基酸的一組氨基酸，這組氨基酸的消耗或生成模式是該物 種的健康、發育中的解凍細胞的指示。

8.根據權利要求6的方法，其中最有活力的解凍細胞的選擇是基于單 一的氨基酸，其消耗或生成模式是該物種的健康、發育中的細胞的指示。

9.根據任意前述權利要求的方法，其中所述解凍細胞源于任意的生物 體，該生物體包括人、牛、豬、羊、任意家畜或者稀有和/或受脅物種。

10.根據權利要求9的方法，其中該方法用于人。

11.根據權利要求10的方法，其中用于選擇標記的氨基酸包括谷氨酸、 谷氨酰胺、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、賴氨酸中的一種或它們的組合。

12.根據權利要求10的方法，其中用于選擇標記的氨基酸是谷氨酰胺、 甘氨酸和丙氨酸。

13.一種區分有發育能力的和發育停止的等級I胚胎的方法，其包括在 含有眾多氨基酸的培養基中培育等級I胚胎和測定該培養基中至少一種氨基 酸的濃度變化。

14.根據權利要求13的方法，其還包括如果所述變化滿足預定的標準 則選擇所述的等級I胚胎用于進一步發育的步驟。

15.根據權利要求13或權利要求14的方法，其中產生了氨基酸消耗或 生成模式。

16.根據權利要求15的方法，其中所述氨基酸消耗或生成模式整體上 用作評估細胞的存活能力的選擇標記。

17.根據權利要求16的方法，其中最有活力的細胞的選擇是基于一組 氨基酸，優選賴氨酸、甘氨酸、色氨酸、精氨酸、谷氨酸和谷氨酰胺。